分光光度法基本原理简介分光光度法（spectrophotometry）是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同，可分为紫外分光光度法、可见分光光度法及红外分光光度法。特点：灵敏度较高，适用于微量组分（1~10μg·L-）的测定；误差较大，相对误差达到2~5%。1.物质的颜色与吸收光的关系电磁波谱：X射线0.1~100nm远紫外光10~200nm近紫外光200~400nm可见光400~760nm近红外光750~2500nm中红外光2500~5000nm远红外光5000~10000nm微波0.1~100cm无线电波1~1000m日光紫蓝青绿黄橙红
1 分光光度法基本原理简介 分光光度法（spectrophotometry）是基于物质分子对光的 选择性吸收而建立起来的分析方法。 按物质吸收光的波长不同，可分为紫外分光光度法、可见 分光光度法及红外分光光度法。 特点： 灵敏度较高，适用于微量组分 (1~10g·L-1)的测定； 误差较大，相对误差达到2~5%。 2 电磁波谱： X射线 0.1~100 nm 远紫外光 10~200 nm 近紫外光 200~400 nm 可见光 400~760 nm 近红外光 750~2500 nm 中红外光 2500~5000 nm 远红外光 5000~10000 nm 微 波 0.1~100 cm 无线电波 1~1000 m 1.物质的颜色与吸收光的关系 日光：紫 蓝 青 绿 黄 橙 红
复合光：由各种单色光组成的光。如白光（太阳光）单色光：只具有一种波长的光。要求：2=±2nm。互补色光：如果把两种适当颜色的光按一定的强度比例混合也可以得到白光，这两种光就叫互补色光。物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的。如：CuSO，呈兰色。物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系日光的互补：蓝<>黄光O互补光650-760nm红400~450nm600~650nm紫橙日光450~480nm蓝580~600nm青蓝480~490nm500~580nm青490-500nm2014-11-3
2014-11-3 3 复合光：由各种单色光组成的光。如白光(太阳光) 单色光：只具有一种波长的光。 要求：=2nm。 互补色光：如果把两种适当颜色的光按一定的强度比例混合也 可以得到白光，这两种光就叫互补色光。 物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用 而产生的。如：CuSO4呈兰色。 物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。 光的互补：蓝 黄 日 光 2014-11-3 4 日光 红 黄 青 绿 蓝 紫 青蓝 橙 650~760nm 450~480nm 580~600nm 480~490nm 600~650nm 500~580nm 400~450nm 490~500nm 互补光
2.物质的吸收曲线M+热M+hyM*-M+荧光或磷光基态激发态Ei(△E)E2AE=E, - E,=h v各能级是量子化；选择性吸收；分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；2014-11-3用不同波长的单色光照射，测定吸光度，如果以波长为横坐标，吸光度为纵坐标即可得一条曲线称为吸收曲线（α~A曲线）06x=510nm0.50.4A 0.30.20.1400450500550600650波长（nm）吸收曲线吸收曲线清楚地描述了物质对光的吸收情况
2014-11-3 5 2.物质的吸收曲线 M + 热 M + 荧光或磷光 E = E2 - E1 = h 各能级是量子化 ；选择性吸收; 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同； M + h M * 基态 激发态 E1 （△E） E2 6 用不同波长的单色光照射，测定吸光度，如果以波长为 横坐标，吸光度为纵坐标即可得一条曲线称为吸收曲线（ ~A 曲线）。 吸收曲线清楚地描述了物质对光的吸收情况。 吸收曲线 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 400 450 500 550 600 650 波长（nm） A max=510 nm
（1）不同物质吸收曲线的形状和吸收波长不同531545U4ACr20%MnO4440400420440460480500520540560580600入吸收曲线（2）同一物质对不同波长光的吸光度不同；同一物质不同浓度，其吸收曲线形状相似。MneA400420440460480500520540560580600入吸收曲线是特性的，可以提供物质的结构信息，作为物质定性分析的依据之一；吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据：
7 （1）不同物质吸收曲线的形状和吸收波长不同。 MnO4 - 531 吸收曲线 2014-11-3 8 （2）同一物质对不同波长光的吸光度不同；同一物质不同浓 度，其吸收曲线形状相似。 吸收曲线是特性的，可以提供物质的结构信息，作为物质定 性分析的依据之一；吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的 重要依据
3.光的吸收定律朗伯-比耳定律吸光度A：物质对光的吸收程度。定义：A=lg (I/1)A越大，表示对光的吸收越大，透过光越弱。1760年朗伯(Lambert)阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系：Aαb1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系：Aαc二者的结合称为朗伯一比耳定律，Aαcbc
9 3.光的吸收定律——朗伯-比耳定律 吸光度A ：物质对光的吸收程度。 定义： A＝lg（I0 /It) A越大，表示对光的吸收越大，透过光越弱。 10 1760年朗伯(Lambert)阐明了光的吸收程度和吸收层 厚度的关系：A∝b • 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物 浓度之间也具有类似的关系：A∝c 二者的结合称为朗伯—比耳定律， A∝bc