1944年,美国科学家 Avery等人又对实验进行了修改 加热杀死的S型菌体外培养没有生长现象 活的R型菌体外培养只能分离出R型菌 二者混合培养—能同时分离出S型菌和R型菌(S型菌 能分离给后代) 从加热杀死的S型菌分离种种物质,如蛋白质、荚膜多 糖、DNA、RNA等,分别与R型菌体外培养 DNA能使R型转化为S型。所以DNA是肺炎双球菌的遗 传物质。 (1)从活的S菌中抽提各种细胞成分(DNA,蛋白质,荚膜多糖等) (2)对各种生化组分进行转化试验 ①加s菌的DNA ②加s菌的DNA和DNA酶以外的酶 长出S菌 ③加s菌的DNA和DNA酶 活R菌 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 只长R菌 ⑥加S菌的英膜多糖
1944年,美国科学家Avery等人又对实验进行了修改: • 加热杀死的S型菌——体外培养——没有生长现象 • 活的R型菌——体外培养——只能分离出R型菌 • 二者混合培养——能同时分离出S型菌和R型菌(S型菌 能分离给后代); • 从加热杀死的S型菌分离种种物质,如蛋白质、荚膜多 糖、DNA、RNA等,分别与R型菌体外培养 DNA能使R型转化为S型。所以DNA是肺炎双球菌的遗 传物质
噬菌体感染实验 1952年,AD. Hershey和 M. Chase发表了证明DNA是噬菌体的遗传物 质基础的著名实验。首先,他们将E.co培养在以放射性3PO3或 3S02作为磷源或硫源的组合培养基中。绩果可以获得含3PDNA 的噬菌体或含3S蛋白质的两种实验用噬菌体。接着他们做了以下两 组实验: 上清液中含 15%放射性 吸附 10分钟后 离心 用捣 仁沉淀中含 使空壳脱离 85%放射性 沉淀细胞进 培养后 量完整的子代噬菌体 吸附 0分钟后 高心 淀中含 使空壳脱离 25放射性 沉淀细胞进一步培 养后,可产生大量 完整的子代噬菌体
2、噬菌体感染实验 • 1952年,A.D.Hershey和M.Chase发表了证明DNA是噬菌体的遗传物 质基础的著名实验。首先,他们将E. coli 培养在以放射性32PO4 3-或 35SO4 2-作为磷源或硫源的组合培养基中。结果,可以获得含32P-DNA 的噬菌体或含35S -蛋白质的两种实验用噬菌体。接着他们做了以下两 组实验:
从以上实验中可看到,在噬菌体的感染过程中,其蛋 白质外壳未进入宿主细胞。进入宿主细胞的只有DNA 但经增殖、装配后,却能产生一大群既有DNA核心又 有蛋白质外壳的完整噬菌体颗粒。这就证明,在其 DNA中,含有包括合成蛋白质外壳在内的整套遗传信
• 从以上实验中可看到,在噬菌体的感染过程中,其蛋 白质外壳未进入宿主细胞。进入宿主细胞的只有DNA, 但经增殖、装配后,却能产生一大群既有DNA核心又 有蛋白质外壳的完整噬菌体颗粒。这就证明,在其 DNA中,含有包括合成蛋白质外壳在内的整套遗传信 息
3、植物病毒的重建实验 1956年, H. Fraenkel- Conran用含RNA的烟草花叶病毒 (TMV)进行了著名的植物病毒重建实验。 ·将TMV放在一定浓度的苯酚溶液中振荡,就能将它的蛋 白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白 质外壳包裹的情况下,也能感染烟草并使其患典型症状 而且在病斑中分离出正常病毒离子。当然,由于RNA是 裸露的,所以感染频率低。在实验中,还选用了另一株 与TMⅴ近缘的霍氏车前花叶病毒(HRv)
3、植物病毒的重建实验 • 1956年,H.Fraenkel-Conrat用含RNA的烟草花叶病毒 (TMV)进行了著名的植物病毒重建实验。 • 将TMV放在一定浓度的苯酚溶液中振荡,就能将它的蛋 白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白 质外壳包裹的情况下,也能感染烟草并使其患典型症状, 而且在病斑中分离出正常病毒离子。当然,由于RNA是 裸露的,所以感染频率低。在实验中,还选用了另一株 与TMV近缘的霍氏车前花叶病毒(HRV)
当用TMV的RNA与 HRⅤ的蛋白质外壳重 建后的杂合病毒去感 TMV 感染 分离纯化 HRV 染烟草时,烟叶上出 现的是典型的TMv病 斑。再从中分离出来 的新病毒也是未带有 任何HRV痕迹的典型 TMV病毒。反之,用 HR的RNA与TMV HRV 的蛋白质外壳进行重 建时,也可获得同样 的结论。这充分说明 原始病 杂合的罹病的重新分离的 毒辣拆开的病鼇病每烟叶 在RNA病毒中,遗传 毒 的物质基础也是核酸。 :83TN重建实验示意图相线箭头小信甜间
• 当用TMV的RNA与 HRV的蛋白质外壳重 建后的杂合病毒去感 染烟草时,烟叶上出 现的是典型的TMV病 斑。再从中分离出来 的新病毒也是未带有 任何HRV痕迹的典型 TMV病毒。反之,用 HRV的RNA与TMV 的蛋白质外壳进行重 建时,也可获得同样 的结论。这充分说明, 在RNA病毒中,遗传 的物质基础也是核酸