1.动物组织(续) 保存:对预处理好的材料,若不立即进行实验 应冷冻保存。 a.冰冻:剥去脂肪和筋皮等结缔组织,短期保存 10℃的冰箱内;长期保存:-70℃低温冰箱内。 b.干燥:对于像脑垂体一类小组织。可置丙酮液 中脱水,干燥后磨粉储存备用:对于含耐高温有 效成分(如:肝素)的肠粘膜,可在沸水蒸煮处理 烘干后能长期保存。 冰箱的除霜循环.可能对細胞造成伤害.要特別 小心。解冻時要越快越好,但避免局部過熱
1.动物组织(续)： 保存：对预处理好的材料，若不立即进行实验， 应冷冻保存。 a.冰冻：剥去脂肪和筋皮等结缔组织，短期保存： －10℃的冰箱内；长期保存：－70℃低温冰箱内。 b.干燥：对于像脑垂体一类小组织，可置丙酮液 中脱水，干燥后磨粉储存备 用；对于含耐高温有 效成分（如：肝素）的肠粘膜，可在沸水蒸煮处理， 烘干后能长期保存。 冰箱的除霜循环，可能对細胞造成伤害，要特別 小心。解冻時要越快越好，但避免局部過熱
2.植物材料 选材:注意植物品种和生长发育状况不同 其中所含生物大分子的量变化很大,另外与季节 性关系密切。种子须泡胀或粉碎才可使用。含油 脂较多的也要进行脱脂处理。 a.提取核DNA:选用黄化苗(生长7-10天小 麦,水稻),防止叶绿体DNA的干扰 b.提取RNA:根据实验目的选用生长幼嫩组织 为好。 保存:冷冻采样后尽快放于-4℃--20℃冰 箱内。 DNA,RNA采样后,N速冻,至-70℃冰箱。对 RNA样,如不立即使用,冷冻保存尤为重要
2.植物材料： 选材：注意植物品种和生长发育状况不同， 其中所含生物大分子的量变化很大，另外与季节 性关系密切。种子须泡胀或粉碎才可使用。含油 脂较多的也要进行脱脂处理。 a.提取核DNA：选用黄化苗（生长7－10天小 麦，水稻），防止叶绿体DNA的干扰 b.提取RNA：根据实验目的选用生长幼嫩组织 为好。 保存：冷冻采样后尽快放于－4℃――20℃冰 箱内。 DNA,RNA 采样后，N2速冻，至－70℃冰箱。对 RNA样，如不立即使用，冷冻保存尤为重要
3.微生物 选材:应注意它的生长期,在微生物的对数生 长期,酶和核酸的含量较高,可以荻得高产量·以 微生物为材料时有两种情况 a,利用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物 和胞外酶等。一般用高心法收集上清液,上清液只 能在低温下短期保存 b.利用菌体含有的生化物质,如:蛋白质,核 酸和胞内酶等。需破碎菌体细胞分离,湿菌体可低 温短期保存,冻干粉可在4C保存数月
3.微生物： 选材：应注意它的生长期，在微生物的对数生 长期，酶和核酸的含量较高，可以获得高产量，以 微生物为材料时有两种情况： a.利用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物 和胞外酶等。一般用离心法收集上清液，上清液只 能在低温下短期保存 b.利用菌体含有的生化物质，如：蛋白质，核 酸和胞内酶等。需破碎菌体细胞分离，湿菌体可低 温短期保存，冻干粉可在4℃保存数月。 3
第二节确立测定方法 有效成分在原材料中含量较低,纯化是使其 纯度增高的过程。因此。提取和分离的每个步骤 均要测定有效成分的含量 测定目的:监控整个制备过程。 测定方法要求:专 准确、灵敏和简便 使用较多的测定方法有分光光度法、荧光分 析法、生物活性(如酶活力、激素活性)测定、电 泳分析等,有时可用电化学法和免疫分析法
有效成分在原材料中含量较低，纯化是使其 纯度增高的过程，因此，提取和分离的每个步骤 均要测定有效成分的含量. 。 测定方法要求: 专一 、准确、灵敏和简便。 使用较多的测定方法有分光光度法、荧光分 析法、生物活性(如酶活力、激素活性)测定、电 泳分析等，有时可用电化学法和免疫分析法
第三节细胞的破碎 捆胞结构:细胞壁、细胞膜、细胞质和核区。 所要物质可存在细胞外(胞外酶)和细胞内(胞内酶) 不同的生物体细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同: 如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎。 植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细 胞壁,要采取专门的细胞破碎方法。 常用方法:一、机械破碎 物理方法 化学处理四、生物酶降解
不同的生物体细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同： 如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎。 植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细 胞壁，要采取专门的细胞破碎方法。 常用方法： 细胞结构：细胞壁、细胞膜、细胞质和核区。 所要物质可存在细胞外（胞外酶）和细胞内（胞内酶）