第二节材料的选择与处理 制备的一般过程和原则确立有效成分的测定方法 材料的选择和预处理 细胞的破碎和细胞组分分离 注意事项 有效成分的抽提 有效成分的纯化和浓缩
第二节 材料的选择与处理 制备的一般过程和原则 注意事项 •确立有效成分的测定方法 •材料的选择和预处理 •细胞的破碎和细胞组分分离 •有效成分的抽提 •有效成分的纯化和浓缩
生物大分子分离纯化的一般步骤和原则 层析法 生物组织→→提取液→→粗产品→ 超离心法 结晶 透析和超滤 1-前处理→|分→|-细分级→ 依据原理 材料选择与处理 分子大小 °盐析( 细胞破碎(机械破 溶解度 等电点沉淀 碎、溶账和自溶、 电荷性质 有机溶剂沉淀 酶解、化学处理) 吸附性质 离心 生物亲和力
层析法 电泳法 超离心法 透析和超滤 •盐析（硫酸铵盐析） •等电点沉淀 •有机溶剂沉淀 •离心 │←前处理→│ ←粗分级→ │ ← 细分级 →│ •材料选择与处理 •细胞破碎（机械破 碎、溶账和自溶、 酶解、化学处理） 生物组织→ →提取液→ →粗产品→ →结晶 •分子大小 •溶解度 •电荷性质 •吸附性质 •生物亲和力 依据原理
注意事项 基本原则:防止生物分子变性、降解 1.控制适当的pH 2.控制低温 3.注意提取过程中的溶液环境 4.防止提纯过程中丢失一些辅助因子或亚 基
基本原则：防止生物分子变性、降解 –1．控制适当的pH –2．控制低温 –3．注意提取过程中的溶液环境 – 4．防止提纯过程中丟失一些辅助因子或亚 基
选择村料及预处理 动物,植物,微生物都可作为制备生物大分子的原材料, 所选用的材料主要依据试验目的來确定。 有成份是指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。而有 效成分以外的其它物质则统称杂质。 在动、植物和微生物材料中,有效成分的含量一般较少。 如胰脏中胰岛素的含量小于其鲜重的百万分之一;稳定性较差, 大多数对酸、碱、髙温和髙浓度有机溶剂等因子较敏感;易被 微生物分解变质。 总的来说,材料选择应遵循的原则是,有效成分含量多、 稳定性好;来源丰富、保持新鲜;提取工艺简单、有综合利用 价值等
一.选择材料及预处理 动物，植物，微生物都可作为制备生物大分子的原材料， 所选用的材料主要依据试验目的来确定。 有效成份是指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。而有 效成分以外的其它物质则统称杂质。 在动、植物和微生物材料中，有效成分的含量一般较少。 如胰脏中胰岛素的含量小于其鲜重的百万分之一；稳定性较差， 大多数对酸、碱、高温和高浓度有机溶剂等因子较敏感；易被 微生物分解变质。 总的来说，材料选择应遵循的原则是，有效成分含量多、 稳定性好；来源丰富、保持新鲜；提取工艺简单、有综合利用 价值等
1.动物组织 选材:必须选择有效成分含量丰富且易分离的脏器组织 为原材料。如磷酸单酯酶,从含量看,虽然在胰脏、肝脏和 脾脏中较丰富,但是因其与磷酸二酯酶共存,进行提纯时 这两种酶很难分开。所以实践中常选用含磷酸单酯酶少,但 几乎不含磷酸二酯酶的前列腺作材料。 脱脂:脏器中含量较高的脂肪容易氧化酸败。导致原 料变质影响纯度操作和制品得率。常用的脱脂方法有:人工 剥去脏器外的脂肪组织;漫泡在脂溶性的有机溶剂(丙酮, 乙醚)中脱脂;采用快速加热(50℃左右),快速冷却的方 法,使溶化的油滴冷却后凝聚成油块而被除去
1.动物组织： 选材：必须选择有效成分含量丰富且易分离的脏器组织 为原材料。如磷酸单酯酶，从含量看，虽然在胰脏、肝脏和 脾脏中较丰富，但是因其与磷酸二酯酶共存，进行提纯时， 这两种酶很难分开。所以实践中常选用含磷酸单酯酶少，但 几乎不含磷酸二酯酶的前列腺作材料。 脱脂：脏器中含量较高的脂肪，容易氧化酸败，导致原 料变质影响纯度操作和制品得率。常用的脱脂方法有：人工 剥去脏器外的脂肪组织；浸泡在脂溶性的有机溶剂（丙酮， 乙醚）中脱脂；采用快速加热（50℃左右），快速冷却的方 法，使溶化的油滴冷却后凝聚成油块而被除去