⑵ 有机溶剂提取 一些和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋 白质和酶难溶于水、稀盐、稀酸、或稀碱中，常用不同 比例的有机溶剂提取。 常用的有机溶剂有乙醇、丙酮、异丙醇、正丁酮等，这 些溶剂可以与水互溶或部分互溶，同时具有亲水性和亲 脂性。 有些蛋白质和酶既溶于稀酸、稀碱，又能溶于含有一定 比例的有机溶剂的水溶液中，在这种情况下，采用稀的 有机溶液提取常常可以防止水解酶的破坏，并兼有除去 杂质提高纯化效果的作用。 例如，胰岛素
⑵ 有机溶剂提取 一些和脂类结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋 白质和酶难溶于水、稀盐、稀酸、或稀碱中，常用不同 比例的有机溶剂提取。 常用的有机溶剂有乙醇、丙酮、异丙醇、正丁酮等，这 些溶剂可以与水互溶或部分互溶，同时具有亲水性和亲 脂性。 有些蛋白质和酶既溶于稀酸、稀碱，又能溶于含有一定 比例的有机溶剂的水溶液中，在这种情况下，采用稀的 有机溶液提取常常可以防止水解酶的破坏，并兼有除去 杂质提高纯化效果的作用。 例如，胰岛素
2.3 生物大分子的分离纯化 由于生物体的组成成分是如此复杂，数千种乃至上 万种生物分子又处于同一体系中，因此不可能有一 个适合于各类分子的固定的分离程序，但多数分离 工作关键部分的基本手段是相同的。 为了避免盲目性，节省实验探索时间，要认真参考 和借鉴前人的经验，少走弯路。常用的分离纯化方 法和技术有： 沉淀法（包括：盐析、有机溶剂沉淀、选择性沉淀 等）、离心、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换 层析、亲和层析、快速制备型液相色谱以及等电聚 焦制备电泳等。本章以介绍沉淀法为主
2.3 生物大分子的分离纯化 由于生物体的组成成分是如此复杂，数千种乃至上 万种生物分子又处于同一体系中，因此不可能有一 个适合于各类分子的固定的分离程序，但多数分离 工作关键部分的基本手段是相同的。 为了避免盲目性，节省实验探索时间，要认真参考 和借鉴前人的经验，少走弯路。常用的分离纯化方 法和技术有： 沉淀法（包括：盐析、有机溶剂沉淀、选择性沉淀 等）、离心、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换 层析、亲和层析、快速制备型液相色谱以及等电聚 焦制备电泳等。本章以介绍沉淀法为主
2.3.1 沉淀法 沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。 沉淀法（即溶解度法）操作简便，成本低廉，不仅 用于实验室中，也用于某些生产目的的制备过程， 是分离纯化生物大分子，特别是制备蛋白质和酶时 最常用的方法。通过沉淀，将目的生物大分子转入 固相沉淀或留在液相，而与杂质得到初步的分离。 其基本原理是根据不同物质在溶剂中的溶解度不同 而达到分离的目的，不同溶解度的产生是由于溶质 分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引 起的，溶解度的大小与溶质和溶剂的化学性质及结 构有关，溶剂组分的改变或加入某些沉淀剂以及改 变溶液的pH值、离子强度和极性都会使溶质的溶解 度产生明显的改变
2.3.1 沉淀法 沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。 沉淀法（即溶解度法）操作简便，成本低廉，不仅 用于实验室中，也用于某些生产目的的制备过程， 是分离纯化生物大分子，特别是制备蛋白质和酶时 最常用的方法。通过沉淀，将目的生物大分子转入 固相沉淀或留在液相，而与杂质得到初步的分离。 其基本原理是根据不同物质在溶剂中的溶解度不同 而达到分离的目的，不同溶解度的产生是由于溶质 分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引 起的，溶解度的大小与溶质和溶剂的化学性质及结 构有关，溶剂组分的改变或加入某些沉淀剂以及改 变溶液的pH值、离子强度和极性都会使溶质的溶解 度产生明显的改变
在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法是： ⑴中性盐沉淀（盐析法）：多用于各种蛋白质 和酶的分离纯化。 ⑵有机溶剂沉淀：多用于蛋白质和酶、多糖、 核酸以及生物小分子的分离纯化。 ⑶选择性沉淀（热变性沉淀和酸碱变性沉淀）： 多用于除去某些不耐热的和在一定pH值下易变 性的杂蛋白。 ⑷等电点沉淀：用于氨基酸、蛋白质及其他两 性物质的沉淀，但此法单独应用较少，多与其 他方法结合使用。 ⑸有机聚合物沉淀： 是发展较快的一种新方 法， 主要使用PEG聚乙二醇（Polyethyene glycol）作为沉淀剂
在生物大分子制备中最常用的几种沉淀方法是： ⑴中性盐沉淀（盐析法）：多用于各种蛋白质 和酶的分离纯化。 ⑵有机溶剂沉淀：多用于蛋白质和酶、多糖、 核酸以及生物小分子的分离纯化。 ⑶选择性沉淀（热变性沉淀和酸碱变性沉淀）： 多用于除去某些不耐热的和在一定pH值下易变 性的杂蛋白。 ⑷等电点沉淀：用于氨基酸、蛋白质及其他两 性物质的沉淀，但此法单独应用较少，多与其 他方法结合使用。 ⑸有机聚合物沉淀： 是发展较快的一种新方 法， 主要使用PEG聚乙二醇（Polyethyene glycol）作为沉淀剂