生物大分子的制备
生物大分子的制备
2.1 概述 在自然科学,尤其是生命科学高度发展 的今天,蛋白质、酶和核酸等生物大分 子的结构与功能的研究是探求生命奥秘 的中心课题,而生物大分子结构与功能 的研究,必须首先解决生物大分子的制 备问题,有能够达到足够纯度的生物大 分子的制备工作为前题,结构与功能的 研究就无从谈起。然而生物大分子的分 离纯化与制备是一件十分细致而困难的 工作
2.1 概述 在自然科学,尤其是生命科学高度发展 的今天,蛋白质、酶和核酸等生物大分 子的结构与功能的研究是探求生命奥秘 的中心课题,而生物大分子结构与功能 的研究,必须首先解决生物大分子的制 备问题,有能够达到足够纯度的生物大 分子的制备工作为前题,结构与功能的 研究就无从谈起。然而生物大分子的分 离纯化与制备是一件十分细致而困难的 工作
与化学产品的分离制备相比较,生物大分子的制 备有以下主要特点: ⑴生物材料的组成极其复杂,常常包含有数百种 乃至几千种化合物。 ⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微,分 离纯化的步骤繁多,流程长。 ⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时 就极易失活,因此分离过程中如何防止其失活,就 是生物大分子提取制备最困难之处。 ⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的, 温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种 组成的综合影响,很难准确估计和判断
与化学产品的分离制备相比较,生物大分子的制 备有以下主要特点: ⑴生物材料的组成极其复杂,常常包含有数百种 乃至几千种化合物。 ⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微,分 离纯化的步骤繁多,流程长。 ⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时 就极易失活,因此分离过程中如何防止其失活,就 是生物大分子提取制备最困难之处。 ⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的, 温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种 组成的综合影响,很难准确估计和判断
生物大分子的制备通常可按以下步骤进行: ①确定要制备的生物大分子的目的和要求,是进行科研、 开发还是要发现新的物质。 ②建立相应的可靠的分析测定方法,这是制备生物大分 子的关键。 ③通过文献调研和预备性实验,掌握生物大分子目的产 物的物理化学性质。 ④生物材料的破碎和预处理。 ⑤分离纯化方案的选择和探索,这是最困难的过程。 ⑥生物大分子制备物的均一性(即纯度)的鉴定,要求 达到一维电泳一条带,二维电泳一个点,或HPLC和毛 细管电泳都是一个峰。 ⑦产物的浓缩,干燥和保存。 ▪
生物大分子的制备通常可按以下步骤进行: ①确定要制备的生物大分子的目的和要求,是进行科研、 开发还是要发现新的物质。 ②建立相应的可靠的分析测定方法,这是制备生物大分 子的关键。 ③通过文献调研和预备性实验,掌握生物大分子目的产 物的物理化学性质。 ④生物材料的破碎和预处理。 ⑤分离纯化方案的选择和探索,这是最困难的过程。 ⑥生物大分子制备物的均一性(即纯度)的鉴定,要求 达到一维电泳一条带,二维电泳一个点,或HPLC和毛 细管电泳都是一个峰。 ⑦产物的浓缩,干燥和保存。 ▪
分析测定的方法主要有两类: 即生物学和物理、化学的测定方法。 生物学的测定法主要有:酶的各种测活方法、蛋 白质含量的各种测定法、免疫化学方法、放射 性同位素示踪法等; 物理、化学方法主要有:比色法、气相色谱和液 相色谱法、光谱法(紫外/可见、红外和荧光 等分光光度法)、电泳法、以及核磁共振等。 实际操作中尽可能多用仪器分析方法,以使分析 测定更加快速、简便
分析测定的方法主要有两类: 即生物学和物理、化学的测定方法。 生物学的测定法主要有:酶的各种测活方法、蛋 白质含量的各种测定法、免疫化学方法、放射 性同位素示踪法等; 物理、化学方法主要有:比色法、气相色谱和液 相色谱法、光谱法(紫外/可见、红外和荧光 等分光光度法)、电泳法、以及核磁共振等。 实际操作中尽可能多用仪器分析方法,以使分析 测定更加快速、简便