琼脂糖凝胶电泳 DNA的琼脂糖凝胶电泳是分子生物学实验中使用广 泛的技术，该技术利用DNA分子在电场下向电场一极迁 徙的特性。在pH中性的条件下，DNA分子由阴极向阳极 迁徙。其间，DNA分子量大，摩擦阻力大，在凝胶的孔隙 中迁徙得慢；分子量小，摩擦阻力小，迁徙快，在电泳 一定时间后，大小不等得DNA分子可以得到有效得分离。 同样分子量的DNA,环状的较线性的迁徙速度快。分离的 DNA可以方便地用溴乙锭染色，方法是1)在灌胶时直接 把溴乙锭混入凝胶，或2)电泳后将凝胶浸入溴乙锭染液 (我们推荐前者)，染色后在紫外透射灯下可以看到橘红 色的DNA条带，在一般实验室最低分辨能力（肉眼可见 的)约为50-100ng
原理 采用限制性内切酶Hind III切开插入DNA与质粒载 体，将这一反应液上样于琼脂糖凝胶，电泳，使分子量小 的插入DNA前移，并与分子量大的在电泳中滞后的质粒载 体DNA分开
实验准备 (参考教材)
实验步骤 1.酶切质粒 取一洁净的l.5 ml Eppendorf管，编好号，插入冰中， 依次加入： 水 7ul 10×缓冲液 2ul BSA 2ul 重组质粒 8ul Hind III lul 20ul 盖上盖，混匀，将反应物甩入管底，置37℃水浴中 温育1小时
2.灌胶 将粘胶纸粘于灌胶模槽的两端，制成灌胶模。放入梳 子。将模放于水平台上。 取一烧杯，放入： 琼脂糖 0.7g 5×TBE 10 ml 水 40 ml 50 ml 混匀，加热，至琼脂糖彻底溶解。待稍冷后，加入5u 饱和的溴乙锭，轻晃混匀，然后轻轻倒入模子。用吸头吸去 表面小泡。待冷却成胶。 如果梳子大且角锐利，应该离模具底部远些，以防拔 梳子时将凝胶底部拔穿