生药学实验指导 (供药学本科用) 主编李鹏 编者成玉怀 石河子大学药学院 二00一年六月
生药学实验指导 (供药学本科用) 主编 李 鹏 编者 成玉怀 石 河 子 大 学 药 学 院 二○○一年六月
目 录 实验一 生药理化鉴别（一）… (2) 实验二 生药理化鉴别（二）… (4) 实验三 根类生药的鉴定… (5) 实验四 根茎类生药的鉴定… (8) 实验五 皮类生药的鉴定… (10) 实验六 叶类生药的鉴定… (11) 实验七 花类生药的鉴定… (13) 实验八 全草类生药的鉴定… (14) 实验九 中成药的显微鉴定… (17) 实验十 未知混合生药粉末的显微鉴定 (18) 附录 一、生药性状的记载方法… (24) 二、显微标本片的制作方法… (26) -1-
目 录 实验一 生药理化鉴别(一)…………………………………………… (2) 实验二 生药理化鉴别(二)…………………………………………… (4) 实验三 根类生药的鉴定……………………………………………… (5) 实验四 根茎类生药的鉴定…………………………………………… (8) 实验五 皮类生药的鉴定……………………………………………… (10) 实验六 叶类生药的鉴定……………………………………………… (11) 实验七 花类生药的鉴定……………………………………………… (13) 实验八 全草类生药的鉴定…………………………………………… (14) 实验九 中成药的显微鉴定…………………………………………… (17) 实验十 未知混合生药粉末的显微鉴定……………………………… (18) 附 录 一、生药性状的记载方法………………………………………………… (24) 二、显微标本片的制作方法……………………………………………… (26) - 1 -
实验一生药理化鉴别（一） 【目的要求】 掌握生药化学成分的主要性质与理化鉴别方法。 【实验主要仪器及试剂】 试管、试管架、天平、量筒、蒸发皿、水浴、烧杯、酒精灯、微量升华装置、显微镜： 蒸馏水、苦味酸钠试纸、浓盐酸、镁粉、1%三氯化铝甲醇试剂、1%氢氧化钠溶液、10% 盐酸、乙醚、10%乙醇、10%醋酸铅、2%3.5-二硝基苯甲酸乙醇溶液、1mo1/LK0H溶液、 0.5%三氯化铁冰醋酸溶液、浓硫酸、生理盐水、1%三氯化铁试液。 【实验材料】 苦杏仁、槐米、大黄、桔梗、甘草、秦皮、2%血球悬浮液。 【实验内容】 式类 1.氰甙 苦味酸钠试纸反应：取苦杏仁(Semen Armeniacae Amarum)粉末0.5g,置于试管中， 加水湿润，管内悬挂苦味酸钠试纸，以软木塞塞住管口，在40~60℃水浴中放置数分钟， 观察试纸颜色变化。 2.黄酮类 取槐米(F1 os Sophorae)粉末0.5g,置于试管中，加乙醇5ml,60~70℃水浴浸润约 20分钟，滤过备用。 (1)盐酸-镁粉反应：取滤液21，加浓盐酸2~3滴，再加入少量镁粉，观察溶液颜色 变化。 (2)三氯化铝反应：取滤液21，加1%三氯化铝甲醇试剂1滴，观察溶液颜色变化。 3.蒽醌类 (1)微量升华试验：取金属片置于有圆孔（直径约2cm)的石棉板上，金属片上放一小 金属圈（高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔，圈内加入少许大黄(Radix et Rhizoma Rhei) 粉末，圈上盖一载玻片，在石棉上圆孔处用洒精灯徐徐加热，观察玻片凝聚物颜色，去火 待冷，将载玻片取下，反转，在显微镜下观察结晶颜色、形状。滴加氢氧化钠（钾）溶液或 氨水，观察溶液现象（羟基蒽醌类）。 (2)Borntrager反应：取大黄粉末0.1g,置于试管中，加1%氢氧化钠溶液2ml,振摇， 观察碱液颜色。滤过，滤液加10%盐酸酸化，观察溶液颜色变化。加入乙醚2m1,振摇， -2-
实验一 生药理化鉴别(一) 【目的要求】 掌握生药化学成分的主要性质与理化鉴别方法。 【实验主要仪器及试剂】 试管、试管架、天平、量筒、蒸发皿、水浴、烧杯、酒精灯、微量升华装置、显微镜； 蒸馏水、苦味酸钠试纸、浓盐酸、镁粉、1％三氯化铝甲醇试剂、1％氢氧化钠溶液、10％ 盐酸、乙醚、10％乙醇、10％醋酸铅、2％3.5-二硝基苯甲酸乙醇溶液、1mol/L KOH溶液、 0.5％三氯化铁冰醋酸溶液、浓硫酸、生理盐水、1％三氯化铁试液。 【实验材料】 苦杏仁、槐米、大黄、桔梗、甘草、秦皮、2％血球悬浮液。 【实验内容】 甙类 1．氰甙 苦味酸钠试纸反应：取苦杏仁(Semen Armeniacae Amarum)粉末0.5g，置于试管中， 加水湿润，管内悬挂苦味酸钠试纸，以软木塞塞住管口，在40～60℃水浴中放置数分钟， 观察试纸颜色变化。 2．黄酮类 取槐米(Flos Sophorae)粉末0.5g，置于试管中，加乙醇5ml，60～70℃水浴浸润约 20分钟，滤过备用。 ⑴盐酸-镁粉反应：取滤液2ml，加浓盐酸2～3滴，再加入少量镁粉，观察溶液颜色 变化。 ⑵三氯化铝反应：取滤液2ml，加1％三氯化铝甲醇试剂1滴，观察溶液颜色变化。 3．蒽醌类 ⑴微量升华试验：取金属片置于有圆孔(直径约2cm)的石棉板上，金属片上放一小 金属圈(高度约0.8cm)，对准石棉板上的圆孔，圈内加入少许大黄(Radix et Rhizoma Rhei) 粉末，圈上盖一载玻片，在石棉上圆孔处用洒精灯徐徐加热，观察玻片凝聚物颜色，去火 待冷，将载玻片取下，反转，在显微镜下观察结晶颜色、形状。滴加氢氧化钠(钾)溶液或 氨水，观察溶液现象(羟基蒽醌类)。 ⑵Bornträger反应：取大黄粉末0.1g，置于试管中，加1％氢氧化钠溶液2ml，振摇， 观察碱液颜色。滤过，滤液加10％盐酸酸化，观察溶液颜色变化。加入乙醚2ml，振摇， - 2 -
观察醚液颜色。吸取醚层置另一试管中，加1%氢氧化钠溶液1ml,观察醚层及碱液颜色（羟 基蒽醌类)。 4.强心甙类 取夹竹桃叶(Folium Nerii)粉末2g,置50ml锥形瓶中，加70%乙醇15ml,水浴上煮 沸5分钟，滤过备用。 (1)kedde反应：取滤液1ml,再加10%醋酸铅溶液1ml,使沉淀完全，滤过，滤液加 等量新鲜配制的3.5-二硝基苯甲酸的碱性乙醇溶液（将2%3.5-二硝基苯甲酸乙醇溶液与 1mo1/LKOH溶液等量混合)，观察溶液颜色变化。 (2)Keller-Ki1iani反应：取滤液2ml于蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加0.5%三氯化铁 冰醋酸溶液溶解，溶液转移至试管中，沿管壁缓缓加入浓硫酸1m1,观察二液面间颜色（强 心甙元)及冰醋酸层颜色（α-去氧糖）。 5.皂甙类 取桔梗(Radix Platycodi)或甘草(Radix Glycyrrhizae)粗粉lg,置于小烧杯中， 加生理盐水15m1,水浴上煮沸20分钟，滤过备用。 (1)泡沫试验：取滤液5m1,置于试管中，用木塞塞紧管口，振摇1分钟，观察是否产 生大量泡沫，观察并记录泡沫高度，放置10分钟，再观察泡沫有无显著消失。 (2)溶血试验：将2%血球悬浮液滴于载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜下，观察血 球形状，然后从盖玻片边缘加1滴滤液，观察是否产生溶血现象。 6.香豆素及其内酯类 (I)荧光检查：取秦皮(Cortex fraxini)、当归(Radix Angelicae Sinensis)或白芷 (Radix Angelicae Dahuricae)粉末0.5g,加水10ml浸泡，日光或紫外灯下观察浸出液荧 光颜色。 (2)显色反应：取秦皮粉末1g,加乙醇10m1,水浴煮沸10分钟，滤过，取滤液2滴于 试管中，加水10ml稀释，日光下观察浸出液荧光颜色（秦皮甲素）。另取滤液1ml,加1%三 氯化铁试液2~3滴，观察溶液颜色变化，再加氨试液3滴，再加5倍水稀释，对光观察溶液 颜色变化（秦皮乙素）。 【作业】 记录各类化学成分的反应过程及结果。 【思考题】 糖、甙类化学成分的主要性质及常用理化鉴别方法。 -3
观察醚液颜色。吸取醚层置另一试管中，加1％氢氧化钠溶液1ml，观察醚层及碱液颜色 (羟 基蒽醌类) 。 4．强心甙类 取夹竹桃叶(Folium Nerii)粉末2g，置50ml锥形瓶中，加70％乙醇15ml，水浴上煮 沸5分钟，滤过备用。 ⑴kedde反应：取滤液1ml，再加10％醋酸铅溶液1ml，使沉淀完全，滤过，滤液加 等量新鲜配制的3.5-二硝基苯甲酸的碱性乙醇溶液(将2％3.5-二硝基苯甲酸乙醇溶液与 1mol/L KOH溶液等量混合)，观察溶液颜色变化。 ⑵Keller-Kiliani反应：取滤液2ml于蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加0.5％三氯化铁 冰醋酸溶液溶解，溶液转移至试管中，沿管壁缓缓加入浓硫酸1ml，观察二液面间颜色(强 心甙元)及冰醋酸层颜色(α-去氧糖)。 5．皂甙类 取桔梗(Radix Platycodi)或甘草(Radix Glycyrrhizae)粗粉1g，置于小烧杯中， 加生理盐水15ml，水浴上煮沸20分钟，滤过备用。 ⑴泡沫试验：取滤液5ml，置于试管中，用木塞塞紧管口，振摇1分钟，观察是否产 生大量泡沫，观察并记录泡沫高度，放置10分钟，再观察泡沫有无显著消失。 ⑵溶血试验：将2％血球悬浮液滴于载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜下，观察血 球形状，然后从盖玻片边缘加1滴滤液，观察是否产生溶血现象。 6．香豆素及其内酯类 ⑴荧光检查：取秦皮(Cortex fraxini)、当归(Radix Angelicae Sinensis)或白芷 (Radix Angelicae Dahuricae)粉末0.5g，加水10ml浸泡，日光或紫外灯下观察浸出液荧 光颜色。 ⑵显色反应：取秦皮粉末1g，加乙醇10ml，水浴煮沸10分钟，滤过，取滤液2滴于 试管中，加水10ml稀释，日光下观察浸出液荧光颜色(秦皮甲素)。另取滤液1ml，加1％三 氯化铁试液2～3滴，观察溶液颜色变化，再加氨试液3滴，再加5倍水稀释，对光观察溶液 颜色变化(秦皮乙素)。 【作 业】 记录各类化学成分的反应过程及结果。 【思考题】 糖、甙类化学成分的主要性质及常用理化鉴别方法。 - 3 -
实验二生药理化鉴别（二） 【目的要求】 掌握生药化学成分的主要性质与理化鉴别方法。 【实验主要仪器及试剂】 试管、试管架、天平、量筒、水浴、烧杯、酒精灯、微量升华装置、显微镜：蒸馏水、 1%盐酸、碘化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅钨酸溶液、30%硝酸、45%乙醇、三氯化 铁溶液、醋酸铅试液、溴水、石灰水、1%香草醛浓硫酸试液。 【实验材料】 百部、黄连、槟榔、五倍子、冰片。 【实验内容】 一、生物碱 1.沉淀反应：取百部(Radix Stemonae)粉末1g,加1%盐酸15ml,水浴加热10分钟， 滤过，将滤液分置于5个试管中（其中一管做空白试验），分别滴加以下生物碱沉淀剂：碘 化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅钨酸试液，观察有无沉淀，并注意沉淀的颜色。 2.显微化学反应 (I)取黄连(Rhizoma Coptidis)粉末少许，置载玻片上，加乙醇1滴润湿，微干，再 加1%盐酸或30%硝酸1~2滴，放置5~10分钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、 颜色（小檗碱）。 (2)取槟榔(Semen Arecae)粉末0.5g,加水2ml及1滴10%硫酸，水浴中煮沸数分钟， 放冷后过滤，取滤液1滴于载玻片上，加碘化铋钾试液1滴，观察溶液颜色变化。放置数分 钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、颜色（槟榔碱）。 二、兼质 沉淀反应：取五倍子(Gal1 a Chinensis)粉末0.5g,置试管中，加水10ml,40~50℃ 水浴中浸润10分钟，滤过，滤液分置于5个试管中（其中一管做空白试验），分别滴加三氯 化铁溶液、醋酸铅试液、溴水、石灰水，观察有无沉淀产生及沉淀的颜色。 三、挥发油 微量升华试验：取冰片(Borneolum Syntyeticum)少许，进行微量升华，将载玻片取下， 反转，置显微镜下，观察结晶形状，加数滴乙醇溶解，然后滴加新配制的1%香草醛浓硫 -4-
实验二 生药理化鉴别(二) 【目的要求】 掌握生药化学成分的主要性质与理化鉴别方法。 【实验主要仪器及试剂】 试管、试管架、天平、量筒、水浴、烧杯、酒精灯、微量升华装置、显微镜；蒸馏水、 1％盐酸、碘化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅钨酸溶液、30％硝酸、45％乙醇、三氯化 铁溶液、醋酸铅试液、溴水、石灰水、1％香草醛浓硫酸试液。 【实验材料】 百部、黄连、槟榔、五倍子、冰片。 【实验内容】 一、生物碱 1．沉淀反应：取百部(Radix Stemonae)粉末1g，加1％盐酸15ml，水浴加热10分钟， 滤过，将滤液分置于5个试管中(其中一管做空白试验)，分别滴加以下生物碱沉淀剂：碘 化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、硅钨酸试液，观察有无沉淀，并注意沉淀的颜色。 2．显微化学反应 ⑴取黄连(Rhizoma Coptidis)粉末少许，置载玻片上，加乙醇1滴润湿，微干，再 加1％盐酸或30％硝酸1～2滴，放置5～10分钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、 颜色(小檗碱)。 ⑵取槟榔(Semen Arecae)粉末0.5g，加水2ml及1滴10％硫酸，水浴中煮沸数分钟， 放冷后过滤，取滤液1滴于载玻片上，加碘化铋钾试液1滴，观察溶液颜色变化。放置数分 钟，盖上盖玻片，置显微镜下，观察结晶形状、颜色(槟榔碱)。 二、鞣质 沉淀反应：取五倍子(Galla Chinensis)粉末0.5g，置试管中，加水10ml，40～50℃ 水浴中浸润10分钟，滤过，滤液分置于5个试管中(其中一管做空白试验)，分别滴加三氯 化铁溶液、醋酸铅试液、溴水、石灰水，观察有无沉淀产生及沉淀的颜色。 三、挥发油 微量升华试验：取冰片(Borneolum Syntyeticum)少许，进行微量升华，将载玻片取下， 反转，置显微镜下，观察结晶形状，加数滴乙醇溶解，然后滴加新配制的1％香草醛浓硫 - 4 -