瓜泰山医学院 细胞生物学 姓名李效良2010-201山学年第三学期时间2011.04.05节次13 课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2009级生物技术本科 授课内容 线粒体与叶绿体 学时数 3 掌握线粒体的半自主性、细胞呼吸及特点、细胞能量转化的三个步骤、氧化磷 教学目的 酸化、底物水平磷酸化、呼吸链。了解能量转化的过程，及线粒体与医学关系 重点 线粒体的半自主性、妇胞的能量转换 难点 细胞的能量转换 自学内容 核编码蛋白的线粒体转运、ATP的合成 使用教具 多媒体课件 相关学科知识 生物化学糖酵解、三羧酸循环等 教学法 讲述法、比较法、 讲授内容钢要，要求及时间分配 复习旧课一细胞骨架-导入新课 5分钟 第七章线粒体与能量转换 一。 线粒体的生物学持征： (一)线粒体的结构：外膜；内膜--膜间腔，基粒；基质（重点讲解线粒体20分钟 内膜的高度不通透性及线粒体的基粒) 线粒体的化学组成 (二)线粒体基因组-一线粒体的半自主性。（细胞内的第二套遗传系统，受核 20分钟 基因的控制，绝大多数蛋白由核基因编码) (三)核编码的线粒体转运（框架-前体蛋白在线粒体外去折叠，多肽链穿 5分钟 越线粒体膜，多肽链在线粒体基质内重新折叠) 二、 细胞呼吸与能量分子 20分钟 细胞呼吸 细胞呼吸的特点(1.本质是线粒体中进行的一系列由酶系所催化的氧化还原 反应，2所产生的能量储存在ATP中，3分步进行，能量逐步释放，4恒温恒 压条件5需要有水参与。) 细胞能量转换分子--~ATP 10分钟
风泰山医学院 细胞生物学 讲授内容纲要、要求及时问分配（附页）》 三、 细胞的能量转换 10分钟 以糖的氧化为例：糖酵解-一细胞质基质 10分钟 三羧酸循环一线粒体基质 电子传递和氧化磷酸化-一线粒体内膜 底物水平磷酸化」 5分钟 呼吸链：复合物I,Ⅱ，Ⅲ、W,CoQ,CytC 20分钟 呼吸链三个主要的能量释放部位： 氧化碎酸化偶联机制-一化学渗透偶联假说 10分钟 能量转换与医学的关系 10分钟 小结 5分钟
瓜泰山医学院 细胞生物学 教案6（实验教案2） 姓名李效良 2010-2011学年第三学期时间09.04.12节次1-3 课程名称 细胞生物学 授课专业及层次 2009级生物技术本科 授课内容 细胞骨架的显示、细胞通透性 学时数 3 教学目的 掌握组织化学法显示以微丝为主的细胞骨架纤维的原理和步聚 重点 细胞骨架的显示 难点 细胞骨架的显示 自学内客 无 使用教具 试验器材 相关学科知识 细胞生物学 教学法 示教 讲授内客纲要、要求及时间分面 一、细胞骨架的显示 （一)原 5分钟 洋葱鳞茎表皮细胞经一定浓度的tritonX-100处理时，可破坏细胞 及细胞内的蛋白质，而细胞骨架系统的蛋白质被保留下来，经国定和染色 后能在光镜下观察到细胞骨架的结构。 (二)方法与步骤： 5分钟 1、取洋葱鳞茎内表皮细胞于6M的PBS中浸泡10分钟.（磷酸缓冲液的作 用：为tritonX-100的处理提供缓冲环境) 2、去处PBS,1i0nX-10037℃处理20分钟.(tritonX-100的作用：坏 细胞壁及细胞内的蛋白质，而细胞骨架系就的蛋白质被保留下来) 3、吸去tritonX--100,加M-缓冲液冲洗.(M-缓冲液冲洗的作用：①对 tritonx--100的清洗：②为下一步戊二的固定提供援冲环墙) 4、吸去M缓冲液，加戊二醛国定10分钟.（戊二醛国定的作用：使大分子 交联在一起，经过处理后， 不致使细胞内的结构发生大的变形，以最大 限度的保证细胞正常生理状况下的形态及结构) 5、吸去戊二醛，加PBS冲洗。（璋酸缓冲液的作用：①对乌二醛的清洗： ②为考马斯亮蓝的柒色提供缓冲环境) 6、吸去PBS,加考马斯亮蓝染色1530分钟，（考马新亮蓝的作用：考马斯 亮蓝不是特异的对细胞骨案进行染色 tritonX-100处理已消 化掉骨架蛋白质外的蛋白质，所以经考马斯亮蓝染色的即为细胞骨架) (三)实验报告要求：
风泰山医学院 细胞生物学 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页） 二、细胞膜的通透性 (一)实验原理：细胞通过细胞膜与周围环境进行有选择性的物质交换。将 5分钟 细胞置于各种不同的等渗溶液中，由于各种溶质的通透性不同，有的 溶质能渗入，有的不能渗入，即使能透入的溶质，其透入的速度也不 同。透入红细胞的溶质能够增高红细胞的渗透压，使水进入红细胞， 进而使红细胞膨胀破裂 发生溶血。因而溶血现象可以作为测量物质 进入红细胞速度的一种指标 (二)实验步骤： 10分钟 1.10%羊红细胞悬液的制备：取一份羊血和10份0.17M氟化钠混匀 即成为稀释的羊红细胞悬液； 2.溶血现象的观察（渗透作用：在试管中加入5m1蒸馆水，然后 加入0.5l羊红细胞悬液 颠倒两次混匀， 观察溶血现象： 3.观察羊红细胞对各种物质的通透性 1)对氣化钠和氯化铵的通透性：在一试管中加入5m10.7M氯化铵， 另一试管中加入0.17M氣化钠，分别加入0,51羊红细胞悬液， 观察是否溶血和溶血时间； 2)分别在0.12M硫酸纳、0.12M草酸铵、0.32W葡萄糖、0.32M甘油 以及0.32M乙醇五种等渗溶液中进行实验，观察溶血现象. (三)实验结果分析 (四)实验报告要求 学生实验： 14