DNA的复制核酸体外扩增的设想PCR技术简史聚合酶链反应的发明3'5ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGCDNA解旋解链引物酶RNA引物合成引物RNA引物引物酶子链延长TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3'5
PCR技术简史 • DNA的复制 • 核酸体外扩增的设想 • 聚合酶链反应的发明 ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 5’ 3’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 3’ 5’ DNA 解旋解链 合成引物 子链延长 GGAUCG 5‘ AUCGCG 5‘ 引物酶 引物酶 RNA引物 RNA引物
DNA的复制核酸体外扩增的设想PCR技术简史聚合酶链反应的发明3'6ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGCDNA解旋解链DNATAGCGCTATCGCATCGACGCT5'聚合酶3合成引物5'3'DNA聚合酶GTAGCTGCGAGGATCG子链延长TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3'5
PCR技术简史 • DNA的复制 • 核酸体外扩增的设想 • 聚合酶链反应的发明 ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 5’ 3’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 3’ 5’ DNA 解旋解链 合成引物 子链延长 GGAUCG 5‘ AUCGCG 5‘ TAGCGCTATCGCATCGACGCT 3’ ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG 3’ DNA 聚合酶 DNA 聚合酶
DNA的复制核酸体外扩增的设想PCR技术简史聚合酶链反应的发明1971年，Khorana提出：经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。一但由于测序和引物合成的困难，以及70年代基因工程技术的发明使克隆基因成为可能，所以，Khorana的设想被人们遗忘了
PCR技术简史 • DNA的复制 • 核酸体外扩增的设想 • 聚合酶链反应的发明 ü 1971年，Khorana提出：经过DNA变 性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶 延伸引物，并不断重复该过程便可 克隆tRNA基因。 ü 但由于测序和引物合成的困难，以 及70年代基因工程技术的发明使克 隆基因成为可能，所以，Khorana的 设想被人们遗忘了
DNA的复制核酸体外扩增的设想PCR技术简史聚合酶链反应的发明1985年，美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明了聚合酶链反应（PCR）基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制最初采用E-ColiDNA聚合酶进行PCR，由于该酶不耐热，使这一过程耗时，费力，且易出错耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪1993年，Mul1is等因此项技术获诺贝尔化学奖
PCR技术简史 • DNA的复制 • 核酸体外扩增的设想 • 聚合酶链反应的发明 • 1985年，美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明 了聚合酶链反应（PCR） • 基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制 • 最初采用E-coli DNA聚合酶进行PCR，由于该酶 不耐热，使这一过程耗时，费力，且易出错 • 耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行， 随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循 环仪 • 1993年，Mullis等因此项技术获诺贝尔化学奖
KaryB.Mullis<<TheUnusualOriginofthePolymeraseChainReaction>>1989年美国《Science》杂志列PCR为十余项重大科学发明之首，比喻1989年为PCR爆炸年，Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。PCR只是一个简单的不起眼玩艺。凯利·穆利斯（KaryMullis）我不认为PCR能够用两种“革命”（政治革命和科学革命)加以说明。…··它的发明并没有改变基因操作的本质。有了PCR，我们能在更广的范围内更快、更容易地进行基因操作，学术界也完全不用等到某人死去或退休后才能接受PCR。它只不过是一种新工具。凯利·穆利斯（KaryMullis）
Ø 1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科 学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获 1993年度诺贝尔化学奖。 Ø PCR只是一个简单的不起眼玩艺。 ——凯利·穆利斯（Kary Mullis) Ø 我不认为PCR能够用两种“革命”(政治革命和科学 革命)加以说明。.它的发明并没有改变基因操作 的本质。有了PCR，我们能在更广的范围内更快、更 容易地进行基因操作，学术界也完全不用等到某人 死去或退休后才能接受PCR。它只不过是一种新工具。 ——凯利·穆利斯（Kary Mullis)