第一节微生物的生长及其特性③计数器法：如血球计数板法④比例计数法：将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例混合后在显微镜下，测各自的数目。（特点：不需测量体积）Coverglass(c)Numberofcellspermilliliterofbacterialsuspension:14cells×20,000,0002.8×108cells/ml.(a) Microbial suspension is addedhere, being careful nottoallowoverflow.Thewholegridhas25largesquares.(b)Microscopic count:all cellsinseveral large squares arecountedand thenumbersaveraged.Thelarge squareshownherehas14bacterialcells
6 ③计数器法: 如血球计数板法 ④比例计数法： 将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例混合后 在显微镜下，测各自的数目。（特点：不需测量体积） 第一节 微生物的生长及其特性
第一节微生物的生长及其特性(2)染色计数法必全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAF染色DTAF：二氯三嗪基氨基荧光素DAPI：4.6-二胖基-2-苯基哚QH0-0ClNNH2N-NHNHN+NH2C-NH2HCl2C1H2NOHDNA
7 ❖全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAF染色 第一节 微生物的生长及其特性 DNA 2ClH2N +NH2 C N H H2N - C NH2 DAPI：4,6-二脒基-2-苯基吲哚 （2）染色计数法 O OH O OH O O H NH N N Cl N Cl DTAF：二氯三嗪基氨基荧光素
第一节微生物的生长及其特性活细胞染色法活细胞：无色>美蓝染色法（酵母活细胞计数）死细胞：蓝色>吖啶橙染色法活细胞：橙色荧光（紫外显微镜）死细胞：绿色荧光
8 ➢美蓝染色法 （酵母活细胞计数） 活细胞：无色 死细胞：蓝色 ➢吖啶橙染色法 （紫外显微镜） 活细胞：橙色荧光 死细胞：绿色荧光 ❖ 活细胞染色法 第一节 微生物的生长及其特性
第一节微生物的生长及其特性（染料）染色法>四氮唑化合物N-NRR-CR[H]R'CI11NNRN-NHRTetrazolium chlorideFormazan甲播化合物刃（染料）四氮唑化合物
9 Formazan NHR N N R’ NR [H] C 甲撍化合物 Tetrazolium chloride NR R N N N Cl- + R’ 四氮唑化合物（染料） ➢四氮唑化合物（染料）染色法 第一节 微生物的生长及其特性
第一节微生物的生长及其特性（染料）常用的四氮唑化合物TTC：2.3.5-氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazoliumchloride)N-NHCI-2H=N+CNNN+HCI无色；被还原后生成红色的2.3.5-三苯基甲韬（TF）：Triphenylformazan10
10 TTC：2,3,5-氯化三苯基四氮唑（triphenyl tetrazolium chloride） C N N N N + Cl- 无色；被还原后生成红色的2,3,5-三苯基甲 撍（TF）：Triphenyl formazan C N NH N N 2H +HCl 第一节 微生物的生长及其特性 常用的四氮唑化合物（染料）