3、接固定相的外形分类 固定相装于柱内的色谱法,使样品沿一个方向移动而达 到分离,称为柱色谱。 固定相呈平板状的色谱法,称为平板色谱,它又可分为 纸色谱(用滤纸作液体的载体(担体support),点样后,用流动相展开, 以达到分离鉴定的目的和薄层色谱(将适当粒度的吸附剂铺成薄层, 以纸层析类似的方法进行物质的分离和鉴定)。 4、按展开程序分类 按照展开程序的不同,可将色谱法分为洗脱法、顶替法、 和迎头法。洗脱法也称冲洗法。工作时,首先将样品加到 色谱柱头上,然后用吸附或溶解能力比试样组分弱得多的气 体或液体作冲洗剂。由于各组分在固定相上的吸附或溶解能 力不同,被冲洗剂带出的先后次序也不同,从而使组分彼此 分离。流出曲线下图
3.按固定相的外形分类 固定相装于柱内的色谱法,使样品沿一个方向移动而达 到分离,称为柱色谱。 固定相呈平板状的色谱法,称为平板色谱,它又可分为 纸色谱(用滤纸作液体的载体(担体support),点样后,用流动相展开, 以达到分离鉴定的目的)和薄层色谱(将适当粒度的吸附剂铺成薄层, 以纸层析类似的方法进行物质的分离和鉴定)。 4.按展开程序分类 按照展开程序的不同,可将色谱法分为洗脱法、顶替法、 和迎头法。 洗脱法也称冲洗法。工作时,首先将样品加到 色谱柱头上,然后用吸附或溶解能力比试样组分弱得多的气 体或液体作冲洗剂。由于各组分在固定相上的吸附或溶解能 力不同,被冲洗剂带出的先后次序也不同,从而使组分彼此 分离。流出曲线下图
load add 1996 B.M.Tissue sample solvent column containing stationary phase 月 collect components
这种方法能使样品的各组分获得良好的分离 色谱峰清晰。此外,除去冲洗剂后,可获得 纯度较高的物质。目前,这种方法是色谱法 中最常用的一种方法。 ● 顶替法是将样品加到色谱柱头后,在惰性流 动相中加入对固定相的吸附或溶解能力比所 有试样组分强的物质为顶替剂(或直接用顶 替剂作流动相),通过色谱柱,将各组分按 吸附或溶解能力的强弱顺序,依次顶替出固 定相。很明显,吸附或溶解能力最弱的组分 最先流出,最强的最后流出。顶替法的流出 曲线如下图
这种方法能使样品的各组分获得良好的分离, 色谱峰清晰。此外,除去冲洗剂后,可获得 纯度较高的物质。目前,这种方法是色谱法 中最常用的一种方法。 ⚫ 顶替法是将样品加到色谱柱头后,在惰性流 动相中加入对固定相的吸附或溶解能力比所 有试样组分强的物质为顶替剂(或直接用顶 替剂作流动相),通过色谱柱,将各组分按 吸附或溶解能力的强弱顺序,依次顶替出固 定相。很明显,吸附或溶解能力最弱的组分 最先流出,最强的最后流出。顶替法的流出 曲线如下图
此法适于制备纯物质或浓缩分离某一组分; 其缺点是经一次使用后,柱子就被样品或顶 替剂饱和,必须更换柱子或除去被柱子吸附 的物质后,才能再使用。 迎头法是将试样混合物连续通过色谱柱,吸 附或溶解能力最弱的组分首先一纯物质的状 态流出,其次则以第一组分和吸附或溶解能 力较弱的第二组分混合物,以此类推。流出 曲线汝如下图该法在分离多组分混合物时,除 第一组分外,其余均非纯态,因此仅适用于 从含有微量杂质的混合物中切割出一个高纯 组分(组分A),而不适用于对混合物进行分 离。根据以上所述,将色谱法的分类总结于 表4-1中
此法适于制备纯物质或浓缩分离某一组分; 其缺点是经一次使用后,柱子就被样品或顶 替剂饱和,必须更换柱子或除去被柱子吸附 的物质后,才能再使用。 ⚫ 迎头法是将试样混合物连续通过色谱柱,吸 附或溶解能力最弱的组分首先一纯物质的状 态流出,其次则以第一组分和吸附或溶解能 力较弱的第二组分混合物,以此类推。流出 曲线如下图.该法在分离多组分混合物时,除 第一组分外,其余均非纯态,因此仅适用于 从含有微量杂质的混合物中切割出一个高纯 组分(组分A),而不适用于对混合物进行分 离。根据以上所述,将色谱法的分类总结于 表4-l中
表色谱法分类 流动相 一气体 液体 超临界流体 固定相液体 固体(吸附剂)一液体 固体 键合固定相 吸附剂健合 多孔离子 固定相 固体交换剂 固定相外形 柱 柱 柱平面平面柱柱 柱 柱 柱 名 称气液 气固 液液 薄层色谱液固健合相 尺寸排离子交超临界流体 色谱 色谱 色谱 纸色谱色谱色谱 阻色谱换色谱色谱