直博生核心课程一一新兴学科与前沿技术 第三讲:结构生物学测定与分析 Structure determination and structural analysis 刘威 第三军医大学全军免疫研究所 Te:02368771962 weiliu2013@icloud.com
第三讲：结构生物学测定与分析 Structure determination and structural analysis 刘威 第三军医大学全军免疫研究所 Tel: 023-68771962 wei_liu_2013@icloud.com 直博生核心课程－－新兴学科与前沿技术
§1生物大分子结构测定的三种 主要方法
§1 生物大分子结构测定的三种 主要方法
核磁芸振波电子显撒镜三维重构 (300氡基酸) (150 kDa) X尉繼憂俸所靳 (大小没有崙) 超过88%的分子结构为X-射线晶体衍 射法解析
超过88%的分子结构为X-射线晶体衍 射法解析 核磁共振波谱 (<300 氨基酸) 电子显微镜三维重构 (>150 kDa) X-射线晶体衍射 (大小没有限制)
-ra diffraction NMR Cryo-EM 优点: 优点: 优点 所测得的结构分辨率高 不需要晶体 可以直接获得分子的形 貌信息,即使在较低分 所能测定的生物大分子的 在溶液状态下测定大分 辨率下,电子显微学也 分子量范围宽 子的结构 可给出有意义的结构信 息 技术的成熟度比较高 测定的结构可以是处于适于解析那些不适合应 应用成本比较低廉 生理环境下的动态构象用射线晶体学和核磁 群,因而能提供大分子共振技术进行分析的样 缺点: 的动态信息 品,如难以结晶的膜蛋 必须先培养出晶体 白,大分子复合体等 缺点: 易同其他技术相结合得 分子在晶体中的堆积往往所能测定的生物大分子 到分子复合体的高分辨 使其被锁定与某一状态, 的分子量范围窄 率的结构信息。 因此X-射线衍射技术目前 仍很难捕捉到分子的动态 应用成本远高于晶体X 缺点: 信息。 射线衍射技术 分辨率低
§2X-射线衍射测定蛋白质结构
§2 X-射线衍射测定蛋白质结构