(2)特点 承载大:1000kb 嵌合率高 插入片段不稳定 生长慢 操纵难 (3)应用 适合高等生物大基因组的克隆、作图
（2）特点 – 承载大：1000kb – 嵌合率高 – 插入片段不稳定 – 生长慢 – 操纵难 （3）应用： – 适合高等生物大基因组的克隆、作图
6. BAC (Bacterial Artificial Chromosome) (1)结构 最小的F因子(因此是质粒):7Kb 复制起始:Ori T→sF6 Sal l NotI Bam Hi Hind Ill Not I IoP 控制拷贝数基因:repE 质粒分配:parE、parA、parB parC 选择性基因:Cm pBeloB AC11 多克隆位点 7400 bps oris repE 图9-7细菌人工染色体 pBeloBAC11 这个质粒具有氯霉素(Cm抗性基因及 Bamh i和 Hind ii位点用于克隆外源DNA片段
6. BAC（Bacterial Artificial Chromosome） （1）结构 – 最小的F 因子（因此是质粒）：7Kb – 复制起始：Ori – 控制拷贝数基因：repE – 质粒分配：parE、 parA、 parB – 选择性基因：Cmr – 多克隆位点
(2)特点 低拷贝数 可以容纳300Kb的插入片段 可以蓝白选择 由于是一种质粒,所有容易操作 稳定 嵌合性低 (3)应用: 适合高度生物大基因组的克隆、作图
（2）特点 – 低拷贝数 – 可以容纳 300 Kb 的插入片段 – 可以蓝白选择 – 由于是一种质粒，所有容易操作 – 稳定 – 嵌合性低 （3） 应用： – 适合高度生物大基因组的克隆、作图
二)转基因载体 1.T质粒: 根癌农杆菌( Agrobacterium tumefaciens)中的致瘤质粒 (tumor-inducing, Ti 结构: (1)TDNA:左右边界之间的DNA序列 a.LB和RB正向不完全重复,可以携带其间的DNA插入到 植物基因组中去 b致瘤基因一(CTK基因)失去分化能力→ disarm c.冠瘿碱合成基因:其启动子nos可用。 (2)Ⅴir区:控制T-DNA转移、整合
（二）转基因载体 1. Ti质粒： 根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）中的致瘤质粒 （tumor-inducing，Ti）。 结构： （1）T-DNA：左右边界之间的DNA序列。 a. LB和RB正向不完全重复，可以携带其间的DNA插入到 植物基因组中去 b. 致瘤基因－（CTK 基因）失去分化能力→disarm c. 冠瘿碱合成基因：其启动子nos 可用。 （2）Vir区：控制T-DNA 转移、整合
Nopal T-DNA Nopaline 感染柳 T-DNA transfer T质粒 树产生 冠缨瘤 Ti plasmid Chromosomal T-DNA DNA T-DNA A tumefaciens bacterium Transformed plant cell
感染柳 树产生 冠缨瘤