液相色谱的方法开发
液相色谱的方法开发
第一步干什么? 想办法得到各种信息 向同行了解是否做过此类样品,或有否类似 样品的分析方法 查文献,如CA(化学文摘) 对色谱柱有足够的了解 掌握分离机理,自己开发方法 充分了解您自己的样品
第一步干什么? 想办法得到各种信息 向同行了解是否做过此类样品,或有否类似 样品的分析方法 查文献,如CA(化学文摘) 对色谱柱有足够的了解 掌握分离机理,自己开发方法 充分了解您自己的样品
分析时要了解哪方面的情况? 灵敏度的要求有多高? 样品的本底是否很复杂? 有多少组份要分析? 对分析的精密度、准确度等有多高要求? 是否因是日常检验,而要求方法容易使用?
分析时要了解哪方面的情况? 灵敏度的要求有多高? 样品的本底是否很复杂? 有多少组份要分析? 对分析的精密度、准确度等有多高要求? 是否因是日常检验,而要求方法容易使用?
分离时要了解哪方面的情况? 要分离(即制备)的样品量有多大? 要分离的组份在样品中的含量很高?还是 微量? 是否需要保持生物活性? 对分离产物纯度的要求有多高? 纯度或活性的鉴定如何完成?
分离时要了解哪方面的情况? 要分离(即制备)的样品量有多大? 要分离的组份在样品中的含量很高? 还是 微量? 是否需要保持生物活性? 对分离产物纯度的要求有多高? 纯度或活性的鉴定如何完成?
一般的具体步骤 先用一根短的色谱柱 用相对较高的流速 使用尽可能纯度高的标准品 先用高强度的洗脱液 调节柱长度改变柱效及分离速度
一般的具体步骤 先用一根短的色谱柱 用相对较高的流速 使用尽可能纯度高的标准品 先用高强度的洗脱液 调节柱长度改变柱效及分离速度 请记住∶ 每次改变一个参数