2.固定相的形状 1)柱层析 2)纸层析 3)薄板层析 3.流动相的物态 1)气相层析 2)液相层析 4.流动相压力 1)低压 2)中压 3)高压
2. 固定相的形状 1) 柱层析 2) 纸层析 3) 薄板层析 3. 流动相的物态 1) 气相层析 2) 液相层析 4. 流动相压力 1) 低压 2) 中压 3) 高压
层析技术的原理和术语 1.平衡关系—分布系数 Kd Cl CS:溶质在固定相中的溶度 Cm:溶质在流动相中的溶度 溶质在固定相中的量 K'(容量因子)= 溶质在固定相中的量 K=βKd(β为相比)
三、层析技术的原理和术语 1. 平衡关系——分布系数 Cs Kd= ——— Cm Cs： 溶质在固定相中的溶度 Cm：溶质在流动相中的溶度 溶质在固定相中的量 K’ (容量因子)= ———————— 溶质在固定相中的量 K’ = β Kd （β为相比）
2.阻滞因数(R值) 溶质的移动速度 Am(流动相的平均截面积) Rf 流动相在色谱系统中的移动速度Am+KdAS(固定相的平均截面积) 3.保留值—保留时间t、保留体积v 柱高(L) to(死时间) tr=to(1+k) 线速度(v) 4.分离度 .15 ri 0.1o R W1+W2 o.05 50100150 Volume (ml)
2. 阻滞因数（Rf值） 溶质的移动速度 Am（流动相的平均截面积） Rf = ————————— = ————— 流动相在色谱系统中的移动速度 Am + Kd ·As（固定相的平均截面积） 3. 保留值——保留时间 tR、保留体积 vR 柱高 （L） t0（死时间） = ———— tR = t0（1 + k’） 线速度（ν） 4. 分离度 tR2—tR1 R = ———— W1+ W2
5、塔板理论——塔板数、塔板高度 塔板数 N=5.54 W ·塔板高度 H
5、塔板理论——塔板数、塔板高度 • 塔板数 tR N = 5.54 { ————} 2 W h/2 • 塔板高度 L H = ——— N
四、柱层析系统 1.工艺流程图 蜗动泵 层析柱 磁力搅拌器 混合泵 紫外检测器 酶试剂分光光度计 酶活力 紫外吸收 部分收集器 双笔记录仪
四、柱层析系统 1. 工艺流程图