定点突变 Pr VH Pr VL Cys ds-Fv 分别构建载体 L链表达载体 H链表达载体 共转染细胞 上午Ffy,疏键稳定的Fv(disulfide-stabilized Fv,ds-Fv小分子抗体的制备
分别构建载体 L链表达载体 H链表达载体 共转染细胞 Pr VH Pr VL Fv [二硫键稳定的Fv (disulfide-stabilized Fv,ds-Fv)]小分子抗体的制备 ds-Fv Cys Cys 上午9时12分36秒 21
Cys Cys 抗体分泌细胞 ds-Fv VH -s-S- VL disulfide-stabilized Fv, ds-Fv FV小分子抗体的制备 大肠杆菌需要将表达产物引入外周质 腔进行轻重链的装配 上午9时12分36秒 22
抗体分泌细胞 VH VL -S-S- Fv小分子抗体的制备 disulfide-stabilized Fv, ds-Fv ds-Fv Cys Cys 大肠杆菌需要将表达产物引入外周质 腔进行轻重链的装配 上午9时12分36秒 22
单链稳定的Fv抗体(scFV) 单链抗体(Single-chain viriable fragment,ScFv)：在DNA 水平用一段长度合适的寡聚核苷酸序列将重链可变区和轻链可变 区连接起来，形成单一链的分子。 Fv ScFv IgG 连接肽 上午9时12分36秒 23
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2.2.2单链抗体（ScFv) o 相对分子量较小，仅为完整抗 scFy Fragment 体的1/6(28KD)。 leader linker -peptide 。连接肽(linker peptide): 长度在10-15个氨基酸左右， 具有柔软性，侧链少，抗原性 弱等特点。常用的连接肽是 (Gly4Ser)3。 承担了维持VH和VL空间构象的功能。 上午9时12分36秒 24
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连接肽的位置与抗体的表达水平相关： VH-Linker-VL 表达量高20倍 VL-Linker-VH 亲和力高10倍 连接效应因子的最好位 可以根据需要选择连 接的方向 点：Linkeri可以在不影响抗体结构 的同时对抗体进行“武装” 25
上午9时12分36秒 25 Linker可以在不影响抗体结构 的同时对抗体进行“武装