靶细胞的获 取
靶细胞的获 取
3 -2 转基因动物构建需要的靶细胞的分类 受精卵 精子载体法 B 胚胎干细胞 体细胞核移植 (ES细胞)
转基因动物构建需要的靶细胞的分类 受精卵 A 精子载体法 C 胚胎干细胞 （ES细胞） B D 体细胞核移植
转基因的 靶细胞 1.受精卵 受精卵可以通过小鼠自然 交配得到，但数量常不能 0-8-88 得到保证。因而需对雌鼠 施以激素以获得足够数量 的受精卵， 即诱导超排 卵。 ntips://www.wps.cn
https ://www.wps. cn 转基因的 靶细胞 1.受精卵 受精卵可以通过小鼠自然 交配得到，但数量常不能 得到保证。因而需对雌鼠 施以激素以获得足够数量 的受精卵——即诱导超排 卵
超排 不同背景的小鼠超排周龄都是不同的，剂量也是不同的。那以常用的C57 小鼠为例，超排周龄为3-4周龄。当达到超排周龄后，向雌小鼠腹腔内注射5 个国际单位(U)的孕马血清促性腺激素(PMSG),然后约46-48h后再注射5U 的人绒毛膜促性腺激素(hCG),12h后即可诱发排卵。 PMSG HCG E0.5 E1.5 E2.5 E3.5 E4.5 E5.5 42-48h Zona pellucida Embryo 交配 Recovery 雌小鼠给予hCG后与成熟雄性小鼠进行合笼。雄鼠交配一般是在夜晚发生，交配 过程中建议不换笼，交配过的雄小鼠，间隔一周后才进行下次交配。交配后过夜 易见小鼠的阴道栓
超排 不同背景的小鼠超排周龄都是不同的，剂量也是不同的。那以常用的C57 小鼠为例，超排周龄为3-4周龄。当达到超排周龄后，向雌小鼠腹腔内注射5 个国际单位(IU)的孕马血清促性腺激素(PMSG)，然后约46-48h后再注射5 IU 的人绒毛膜促性腺激素(hCG)，12h后即可诱发排卵。 交配 雌小鼠给予hCG后与成熟雄性小鼠进行合笼。雄鼠交配一般是在夜晚发生，交配 过程中建议不换笼，交配过的雄小鼠，间隔一周后才进行下次交配。 交配后过夜 易见小鼠的阴道栓
1)受精卵的获取 哺乳动物的受精过程发生在输卵管内，小鼠胚胎进入子宫着床时间大约为4天左右。 因此，需要在配种后或受精后的适当时间从超排供体收集不同时期的胚胎。 小鼠受精后4.5天内早期胚胎发育的过程： 收取受精卵的时间点： 2 E2.75 E30 E45 见栓0.5天的小鼠 -ca ·收集高质量的受精卵，才能更有效地进行显微注射、胚胎移植或冻存复苏，保证获得高质 量的子代小鼠
• 收集高质量的受精卵，才能更有效地进行显微注射、胚胎移植或冻存复苏，保证获得高质 量的子代小鼠 1）受精卵的获取 哺乳动物的受精过程发生在输卵管内，小鼠胚胎进入子宫着床时间大约为4天左右。 因此，需要在配种后或受精后的适当时间从超排供体收集不同时期的胚胎。 小鼠受精后4.5天内早期胚胎发育的过程： 收取受精卵的时间点： 见栓0.5天的小鼠