第2单元蛋白质 (一)名词解释 1.兼性离子( zwItterion):2.等电点( isoelectric point,pI);3.构象 (conformation) 4别构效应( allosteric effect;5.超二级结构( super- secondary structure):6.结构域( structural domain, domain);7.蛋白质的三级结构( tertiary stracture of protein);8. Edman降解法( Edman degradation):9.蛋白质的变性作用 ( denaturation of protein);10.Bohr效应( Bohr effect);11.多克隆抗体( polyclonal antibody)和单克隆抗体( monochonal antibody);12分子伴侣( molecular chaperone); 13.盐溶与盐析( salting in and salting out)。 (二)填充题 1氨基酸在等电点时,主要以 离子形式存在,在pH>pl的溶液中,大部分 离子形式存在,在pH<pl的溶液中,大部分以 离子形式存在。 2组氨酸的pK(a-CO0)值是182,pK2(咪唑基)值是600,pK(a-№)值是9.17,它 的等电点是 3Asp的pK1=2.09,pK2=386,pk3=9,82,其pl等于 4在近紫外区能吸收紫外光的氨基酸有 和 其中 的摩尔吸光系数最大。 5.蛋白质分子中氮的平均含量为 ,故样品中的蛋白质含量常以所测氮量乘以 即是。 6实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应,然后用碱(NaOH来滴定 上放出的 7除半胱氨酸和胱氨酸外,含硫的氨基酸还有 除苏氨酸和酪氨酸外,含羟 基的氨基酸还有 在蛋白质中常见的20种氨基酸中, 是一种亚氨基 不含不对称碳原子 8蛋白质的氨基酸残基是由 键连接成链状结构的,其氨基酸残基的 称 蛋白质的一级结构。 9.β-折叠片结构的维持主要依靠两条肽键之间的肽键形成 来维持 10.在a螺旋中C=O和N-H之间形成的氢键与 基本平行,每圈螺旋包含 个氨基酸残基,高度为 每个氨基酸残基使螺旋轴上升 并沿轴旋转 ll蛋白质颗粒在电场中移动的速率主要取决于 的大小和 量的多少 12用凝胶过滤法分离蛋白质,相对分子质量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较 因此最先流出凝胶柱的蛋白质,其相对分子质量最 13血红蛋白的辅基是 ,当其中的1个亚基与氧结合后,其余亚基与氧的亲合 力 这种现象称 当CO2或H浓度增高时,血红蛋白与氧的亲合力 这种现象称 14蛋白质变性时空间结构 ,而一级结构,变性后,蛋白质的溶解度 般会 生物学功能 5.稳定蛋白质胶体溶液的因素是 和 16凝集素是一类能与 相互作用的蛋白质。 17.免疫球蛋白G(lgG)含有条重链, 条轻链,通过 键联接 成Y形结构,每一分子含有 个抗原结合部位
第 2 单元 蛋白质 （一）名词解释 1．兼性离子（zwitterion）； 2.等电点（isoelectric point,pI）； 3.构象 (conformation）； 4.别构效应(allosteric effect）； 5.超二级结构(super-secondary structure）； 6.结构域（structural domain,domain）； 7. 蛋白质的三级结构（tertiary stracture of protein）； 8.Edman 降解法（Edman degradation）； 9.蛋白质的变性作用 (denaturation of protein)； 10.Bohr 效应（Bohr effect）； 11.多克隆抗体（polyclonal antibody）和单克隆抗体（monochonal antibody）； 12.分子伴侣（molecular chaperone）； 13.盐溶与盐析(salting in and salting out）。 （二）填充题 1.氨基酸在等电点时，主要以__________离子形式存在，在 pH＞pI 的溶液中，大部分 以________离子形式存在，在 pH＜pI 的溶液中，大部分以________离子形式存在。 2.组氨酸的 pK1(α-COOH)值是 1.82，pK2 (咪唑基)值是 6.00， pK3(α-NH3 + )值是 9.17，它 的等电点是__________。 3.Asp 的 pK1=2.09，pK2= 3.86，pK3=9，82，其 pI 等于________。 4.在近紫外区能吸收紫外光的氨基酸有________、________和_________。其中_______ 的摩尔吸光系数最大。 5 .蛋白质分子中氮的平均含量为_______，故样品中的蛋白质含量常以所测氮量乘以 _______即是。 6.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱(NaOH)来滴定 _________上放出的__________。 7.除半胱氨酸和胱氨酸外，含硫的氨基酸还有_________，除苏氨酸和酪氨酸外，含羟 基的氨基酸还有__________，在蛋白质中常见的 20 种氨基酸中，__________是一种亚氨基 酸，___________不含不对称碳原子。 8.蛋白质的氨基酸残基是由_________键连接成链状结构的，其氨基酸残基的______称 蛋白质的一级结构。 9.β-折叠片结构的维持主要依靠两条肽键之间的肽键形成________来维持。 10.在 螺旋中 C=O 和 N—H 之间形成的氢键与_______基本平行，每圈螺旋包含_____ 个氨基酸残基，高度为_______，每个氨基酸残基使螺旋轴上升______，并沿轴旋转______ 度。 11.蛋白质颗粒在电场中移动的速率主要取决于_______的大小和_______量的多少。 12.用凝胶过滤法分离蛋白质，相对分子质量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较 _______，因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其相对分子质量最_______。 13.血红蛋白的辅基是________，当其中的 1 个亚基与氧结合后，其余亚基与氧的亲合 力______，这种现象称________，当 CO2 或 H+浓度增高时，血红蛋白与氧的亲合力_______， 这种现象称_________。 14 蛋白质变性时空间结构________，而一级结构_________，变性后，蛋白质的溶解度 一般会_________，生物学功能________。 15.稳定蛋白质胶体溶液的因素是________和________。 16.凝集素是一类能与_________相互作用的蛋白质。 17.免疫球蛋白 G（IgG）含有________条重链，_______条轻链，通过________键联接 成 Y 形结构，每一分子含有_______个抗原结合部位
18球状蛋白质形成空间结构时,肽链的熵 而环境中水的熵 19.一般说来,球状蛋白质在其分子内部含有 性氨基酸残基,而在分子外表面 性氨基酸残基 20.胰蛋白酶专一性地切断 和的羧基端肽键。 (三)选择题(在备选答案中选出1个或多个正确答案) 1.下列蛋白质组分中,哪一种在280nm具有最大的光吸收 A.色氨酸的吲哚环B.酪氨酸的酚环C.苯丙氨酸的苯环 D.半胱氨酸的硫原子E.肽键 2关于氨基酸的叙述哪一项是错误的? A.酪氨酸和丝氨酸含羟基 B酪氨酸和苯丙氨酸含苯环 C.亮氨酸和缬氨酸是支链氨基酸D.赖氨酸和精氨酸是碱性氨基酸 E.谷氨酸和天冬氨酸含两个氨基 3在pH7时,其R基带有电荷的氨基酸是 A.缬氨酸B.甘氨酸C半胱氨酸D.酪氨酸E.赖氨酸 4每个蛋白质分子必定具有的结构是什么 A.a-螺旋B.β一折叠C.三级结构D.四级结构 5下列哪一种氨基酸侧链基团的pKa值最接近于生理pH值? A.半胱氨酸B.谷氨酸C.谷氨酰胺D.组氨酸E.赖氨酸 6.Arg的pK1=2.17,pK2=9.04,pK3=12.48其pl等于 A.5613 B.7.332 C.7.903 D.10.76 7关于蛋白质中L氨基酸之间形成的肽键,下列哪些叙述是正确的 A.具有部分双键的性质 比通常的CN单键短 C.通常有一个反式构型D.能自由旋转 8.典型的a螺旋是 A.2.610B.310C.3.613D.4.01E.4416 9维持蛋白质分子中的a螺旋主要靠 A.盐键B.范德华键C共价键D.氢键 10维系蛋白质三级结构稳定的最重要的键或作用力是 A盐键B二硫键 C氢键D疏水作用力 E范德华力 ll.红蛋白质的氧合曲线是 A.双曲线B抛物线C.S形曲线D.直线E钟罩形 12维持蛋白质二级结构的主要化学键是 A.肽键 B二硫键C氢键D疏水键 13存在于蛋白质分子中的下列作用力,哪项不是次级键 A.氢键B肽键C盐键D疏水键E.二硫键 14关于蛋白质三级结构的描述错误的是 A.有三级结构的蛋白质均有酶活性 B球蛋白均有三级结构 C.三级结构的稳定性由多种次级键维系 D亲水基团多分布在三级结构的表面 E决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列 15某蛋白质的等电点为7.5,在pH60的条件下进行电泳,它的泳动方向是 A.在原点不动B向正极移动C向负极移动D无法预测 16用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时,下列哪项是正确的 A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来B分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来
18.球状蛋白质形成空间结构时，肽链的熵_________，而环境中水的熵_________。 19 .一般说来，球状蛋白质在其分子内部含有________性氨基酸残基，而在分子外表面 含________性氨基酸残基。 20.胰蛋白酶专一性地切断________和________的羧基端肽键。 （三）选择题（在备选答案中选出 1 个或多个正确答案） 1.下列蛋白质组分中，哪一种在 280nm 具有最大的光吸收？ A. 色氨酸的吲哚环 B. 酪氨酸的酚环 C. 苯丙氨酸的苯环 D. 半胱氨酸的硫原子 E. 肽键 2.关于氨基酸的叙述哪一项是错误的？ A. 酪氨酸和丝氨酸含羟基 B.酪氨酸和苯丙氨酸含苯环 C. 亮氨酸和缬氨酸是支链氨基酸 D.赖氨酸和精氨酸是碱性氨基酸 E. 谷氨酸和天冬氨酸含两个氨基 3.在 pH7 时，其 R 基带有电荷的氨基酸是 A. 缬氨酸 B. 甘氨酸 C. 半胱氨酸 D. 酪氨酸 E. 赖氨酸 4.每个蛋白质分子必定具有的结构是什么 A. α-螺旋 B. β-折叠 C. 三级结构 D. 四级结构 5.下列哪一种氨基酸侧链基团的 pKa 值最接近于生理 pH 值？ A. 半胱氨酸 B. 谷氨酸 C. 谷氨酰胺 D. 组氨酸 E. 赖氨酸 6. Arg 的 pK1ˊ=2.17，pK2ˊ=9.04， pK3ˊ=12.48 其 pIˊ等于 A .5.613 B. 7.332 C. 7.903 D. 10.76 7.关于蛋白质中 L-氨基酸之间形成的肽键，下列哪些叙述是正确的 A. 具有部分双键的性质 B. 比通常的 C-N 单键短 C. 通常有一个反式构型 D. 能自由旋转 8.典型的 螺旋是 A. 2.610 B. 310 C. 3.613 D. 4.015 E. 4.416 9.维持蛋白质分子中的α螺旋主要靠 A. 盐键 B. 范德华键 C. 共价键 D. 氢键 10.维系蛋白质三级结构稳定的最重要的键或作用力是 A 盐键 B 二硫键 C 氢键 D 疏水作用力 E 范德华力 11.血红蛋白质的氧合曲线是 A.双曲线 B.抛物线 C. S 形曲线 D.直线 E.钟罩形 12.维持蛋白质二级结构的主要化学键是 A.肽键 B.二硫键 C.氢键 D.疏水键 13.存在于蛋白质分子中的下列作用力，哪项不是次级键 A .氢键 B.肽键 C.盐键 D.疏水键 E.二硫键 14.关于蛋白质三级结构的描述错误的是 A.有三级结构的蛋白质均有酶活性 B.球蛋白均有三级结构 C.三级结构的稳定性由多种次级键维系 D.亲水基团多分布在三级结构的表面 E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列 15.某蛋白质的等电点为 7.5，在 pH6.0 的条件下进行电泳，它的泳动方向是 A.在原点不动 B.向正极移动 C.向负极移动 D.无法预测. 16.用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时，下列哪项是正确的 A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来 B.分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来
C.不带电荷的蛋白质最先洗脱来来 D带电荷的蛋白质最先洗脱来来 E没有被吸附的蛋白质最先洗脱下来 17.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时,第一个被洗脱下来的氨基酸是 A.wal(pl为596)B.Lys(pl为9.74) C.Asp(pl为277)D.Arg(pl为1076) 18为获得不变性的蛋白质,常用的方法有 A.用三氯醋酸沉淀B用苦味酸沉淀C用重金属盐沉淀 D.低温盐析 E.常温醇沉淀 19用6mo/LHCl水解某种蛋白质时能检出的氨基酸种类是 A.20种B.19种C.18种D.17种或更少 20SDS凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质 Apl的差异 B分子大小的差异C分子极性的差异 D溶解度的差异E以上说法都不对 21血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于 AO2分压降低BCO2分压降低CCO2分压增高 DN2分压增高EpH值降低 22如果要测定一个小肽的氨基酸顺序,下列试剂中你认为最合适使用哪一个 A.茚三酮 B. CNBI C胰蛋白酶D异硫氰酸苯酯 23下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的? A.四个血红素基各自独立地与氧结合,彼此之间并无联系 B以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图,曲线呈S形 C.氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳弱 D氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化 24关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的? A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂 B是由于非共价键破裂引起的 C用透析法除去尿素有时可以使变性蛋白质复性D变性的蛋白质一定会沉淀 25一个生物样品的含氮量为5%,它的蛋白质含量为 A.12.50%B.16.00% D.31.25% (四)判断题 1.氨基酸为氨基取代的羧酸,可直接用酸碱滴定法进行定量测定。 2当溶液的pH等于某一可解离基团的pKa时,该基团一半被解离 3在pH很高或很低的溶液中,氨基酸主要以非离子化形式出现。 4肽链的主链有1/3化学键不能旋转 5溴化氰可以断裂甲硫氨酸的氨基参与形成的肽链。 6体内合成肽链的方向是从N端向C端,而在体外用固相化学合成法合成多肽时,通 常是从C端向N端合成 7核磁共振研究蛋白质三维结构的主要优势是可以研究溶液中的蛋白质三维结构,并能 提供有关的动态信息。 8在水溶液中,蛋白质折叠形成疏水核心,会使水的熵增加。 9原子之间的距离越小,范德华引力越强。 10.在α-螺旋中,每36个氨基酸绕一圈,并形成1个氢键。 ll胶原蛋白的原胶原分子是3股右手螺旋扭曲成的左手螺旋 12.球蛋白的三维折叠多采取亲水侧基在外,疏水侧基藏于分子内部的结构模式
C.不带电荷的蛋白质最先洗脱来来 D.带电荷的蛋白质最先洗脱来来 E.没有被吸附的蛋白质最先洗脱下来 17.有一蛋白质水解产物在 pH6 用阳离子交换柱层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是 A. Val（pI 为 5.96） B. Lys（pI 为 9.74） C. Asp（pI 为 2.77） D. Arg （pI 为 10.76） 18.为获得不变性的蛋白质，常用的方法有 A.用三氯醋酸沉淀 B.用苦味酸沉淀 C.用重金属盐沉淀 D.低温盐析 E.常温醇沉淀 19.用 6mol/LHCl 水解某种蛋白质时能检出的氨基酸种类是 A. 20 种 B. 19 种 C. 18 种 D. 17 种或更少 20.SDS 凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质 A.pI 的差异 B.分子大小的差异 C.分子极性的差异 D.溶解度的差异 E.以上说法都不对 21.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于 A.O2 分压降低 B.CO2 分压降低 C.CO2 分压增高 D.N2 分压增高 E.pH 值降低 22.如果要测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中你认为最合适使用哪一个 A .茚三酮 B.CNBr C.胰蛋白酶 D.异硫氰酸苯酯 23.下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的？ A.四个血红素基各自独立地与氧结合，彼此之间并无联系 B.以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图，曲线呈 S 形 C.氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳弱 D.氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化 24.关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的？ A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂 B.是由于非共价键破裂引起的 C.用透析法除去尿素有时可以使变性蛋白质复性 D.变性的蛋白质一定会沉淀 25.一个生物样品的含氮量为 5%，它的蛋白质含量为 A .12.50% B. 16.00% C. 38.00% D. 31.25% （四）判断题 1.氨基酸为氨基取代的羧酸，可直接用酸碱滴定法进行定量测定。 2.当溶液的 pH 等于某一可解离基团的 pKa 时，该基团一半被解离。 3.在 pH 很高或很低的溶液中，氨基酸主要以非离子化形式出现。 4.肽链的主链有 1/3 化学键不能旋转。 5.溴化氰可以断裂甲硫氨酸的氨基参与形成的肽链。 6.体内合成肽链的方向是从 N 端向 C 端，而在体外用固相化学合成法合成多肽时，通 常是从 C 端向 N 端合成。 7.核磁共振研究蛋白质三维结构的主要优势是可以研究溶液中的蛋白质三维结构，并能 提供有关的动态信息。 8.在水溶液中，蛋白质折叠形成疏水核心，会使水的熵增加。 9.原子之间的距离越小，范德华引力越强。 10.在α-螺旋中，每 3.6 个氨基酸绕一圈，并形成 1 个氢键。 11.胶原蛋白的原胶原分子是 3 股右手螺旋扭曲成的左手螺旋。 12.球蛋白的三维折叠多采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构模式
13.胎儿血红蛋白与2,3-二磷酸甘油(2,3-DPG)的结合力较弱。 14血红蛋白与氧的结合能力随pH降低而增高 15由于一级结构可以决定空间结构,基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构 象。 16测定别构酶的相对分子质量可以用SDS-PAGE。 17.当溶液的pH小于某蛋白质的pl时,该蛋白质在电场中向阳极移动 18用凝胶过滤分离蛋白质,小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。 19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢,可用增加NaCI浓度或降低pH的方法将其从层 析柱洗脱出来。 20糖蛋白的N-糖肽键是指与天冬酰胺的γ-酰胺N原子与寡糖链形成糖苷链。 23糖蛋白的O糖肽键是指氨基酸残基的羧基O原子与寡糖链形成的糖苷键。 (五)分析和计算题 1判断氨基酸所带的净电荷,用plpH比ph-pl更好,为什么? 2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点 3在下面指出的pH条件下,下列蛋白质在电场中向哪个方向移动?A表示向阳极,B 表示向阴极,C表示不移动。人血清蛋白:pH5.5,pHB3.5;血红蛋白:pH7.07,pH9.0;胸 腺组蛋白:pH5.0,pH80,pH1l5;已知:人血清蛋白的pl=464血红蛋白的pl=7.07胸 腺组蛋白的pl=10.8 4简述蛋白质溶液的稳定因素,和实验室沉淀蛋白质的常用方法。 5简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。 6在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有何影响?(1)pH值从70增 加到74;(2)CO2分压从1000Pa增加到4000Pa:(3)O2分压从6000Pa下降到2000Pa (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从8×10moL下降到2×10oL:(5)a2B2解聚成单个亚基 7胎儿血红蛋白(HbF)在相当于成年人血红蛋白(HbA)B链143残基位置含有Ser, 而成年人B链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向B亚基之间的中央空隙。(1) 为什么2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF更牢固?(2) HbF对2,3-BPG低亲和力如何影响到HbF对氧的亲和力?这种差别对于氧从母体血液向 胎儿血液的运输有何意义。 8试述蛋白质二级结构的三种基本类型。 9蛋白质变性后,其性质有哪些变化? 10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。(1)在低pH值时沉淀。(2)当离 子强度从零逐渐増加时,其溶解度开始増加,然后下降,最后出现沉淀。(3)在一定的离子 强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度。(4)加热时沉淀。(5)加入一种可和 水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,导致溶解度的减小。(6)如果加入一种非极性 强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。 1l凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过 滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白质分子越小,迁移速度 越快? 12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸相对分子质量为204。(1) 计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大 约为7万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基? 参考答案
13.胎儿血红蛋白与 2，3-二磷酸甘油（2,3—DPG）的结合力较弱。 14.血红蛋白与氧的结合能力随 pH 降低而增高。 15.由于一级结构可以决定空间结构，基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构 象。 16.测定别构酶的相对分子质量可以用 SDS-PAGE。 17.当溶液的 pH 小于某蛋白质的 pI 时，该蛋白质在电场中向阳极移动。 18.用凝胶过滤分离蛋白质，小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。 19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢，可用增加 NaCI 浓度或降低 pH 的方法将其从层 析柱洗脱出来。 20.糖蛋白的 N-糖肽键是指与天冬酰胺的 γ-酰胺 N 原子与寡糖链形成糖苷链。 23.糖蛋白的 O-糖肽键是指氨基酸残基的羧基 O 原子与寡糖链形成的糖苷键。 （五）分析和计算题 1.判断氨基酸所带的净电荷，用 pI-pH 比 pH-pI 更好，为什么？ 2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点。 3.在下面指出的 pH 条件下，下列蛋白质在电场中向哪个方向移动？A 表示向阳极，B 表示向阴极，C 表示不移动。人血清蛋白：pH5.5，pH3.5；血红蛋白：pH7.07，pH9.0；胸 腺组蛋白：pH5.0，pH8.0，pH11.5；已知：人血清蛋白的 pI=4.64 血红蛋白的 pI=7.07 胸 腺组蛋白的 pI=10.8。 4.简述蛋白质溶液的稳定因素，和实验室沉淀蛋白质的常用方法。 5.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。 6.在体外，用下列方法处理，对血红蛋白与氧的亲和力有何影响？（1）pH 值从 7.0 增 加到 7.4；(2) CO2 分压从 1000 Pa 增加到 4 000 Pa；(3) O2 分压从 6000 Pa 下降到 2000 Pa； (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从 8×10-4mol/L 下降到 2×10-4 ol/L；（5）α2β2 解聚成单个亚基。 7.胎儿血红蛋白（Hb F）在相当于成年人血红蛋白（Hb A） 链 143 残基位置含有 Ser， 而成年人 链的这个位置是具阳离子的 His 残基。残基 143 面向 亚基之间的中央空隙。（1） 为什么 2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脱氧 Hb A 的结合比同脱氧 Hb F 更牢固？（2） Hb F 对 2，3-BPG 低亲和力如何影响到 Hb F 对氧的亲和力？这种差别对于氧从母体血液向 胎儿血液的运输有何意义。 8.试述蛋白质二级结构的三种基本类型。 9.蛋白质变性后，其性质有哪些变化？ 10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。（1）在低 pH 值时沉淀。（2）当离 子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。（3）在一定的离子 强度下，达到等电点 pH 值时，表现出最小的溶解度。（4）加热时沉淀。（5）加入一种可和 水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数，导致溶解度的减小。（6）如果加入一种非极性 强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。 11.凝胶过滤和 SDS-PAGE 均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过 滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在 SDS-PAGE 中，蛋白质分子越小，迁移速度 越快？ 12.已知牛血清白蛋白含色氨酸 0.58%（按质量计），色氨酸相对分子质量为 204。（1） 计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量（2）用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大 约为 7 万，问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基？ 参考答案
(一)名词解释 氨基酸、蛋白质等分子既含有酸性基团,又含有碱性基团,在中性pH的水溶液中, 羧基等酸性基团脱去质子带负电荷,氨基等碱性基团结合质子带正电荷,这种既有带负电荷 基团,又有带正电荷基团的离子称兼性离子或两性离子,亦称偶极离子( dipolar ion) 2调节两性离子(氨基酸、蛋白质等)溶液的pH,使该两性离子所带的净电荷为零 在电场中既不向正极,也不向负极移动,此时,溶液的plH称该两性离子的等电点(p) 不同结构的两性离子有不同的pl值 3构象是指具有相同结构式和相同构型的分子在空间里可能的多种形态,构象形态间的 改变不涉及共价键的破裂。一个给定的蛋白质理论上可采取多种构象,但在生理条件下,只 有一种或很少几种在能量上是有利的。 4多亚基蛋白质一般具有多个配体结合部位,结合在蛋白质分子的特定部位上的配体对 该分子的其它部位所产生的影响(如改变亲和力或催化能力称为别构效应。别构效应可分为 同促效应和异促效应 5在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,经常可以看到由若干相邻的二级结构单远组合在 起,彼此相互作用,形成有规则、在空间上能辩认的二级结构组合体,充当三级结构的构 件,称为超二级结构。称为超二级结构在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整 的结构域。常见的超二级结构有aa,Ba, Rossman折叠,β-发夹,β-曲折,希腊花式拓 扑结构( Greek key topology)等 6蛋白质的三级结构常可区分成1个和数个球状区域,折叠得较为紧密,各行其功能, 称为结构域。 7.蛋白质的三级结构指肽链在二级结构,超二级结构,结构域(对分子较大,由多个结 构域的蛋白质而言)基础上形成的完整空间结构,一个三级结构单位通常由一条肽链组成 但也有一些三级结构单位是由经二硫键连接的多条肽链组成的,如胰岛素就是由两条肽链折 叠成的1个三级结构单位 8为肽链氨基酸测序的方法。异硫氰酸苯脂与肽段氨基末端的游离α-氨基作用,再用冷 稀酸处理,氨基末端残基从肽链上脱落下来,成为异硫氰酸苯酯的衍生物,用层析的方法可 鉴定为何种氨基酸的衍生物。残留的肽链可继续与异硫氰酸苯酯作用,逐个鉴定出氨基酸的 排列顺序。 9天然蛋白质因受物理的或化学的因素影响,其分子内部原有的高度规律性结构发生变 化,致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变,但并不导致蛋白质一级结构的破坏, 这种现象称变性作用。 10H和CO2浓度增加,会降低氧和血红蛋白的亲和力,使得血红蛋白的氧合曲线向右 移动,提高了O2从血红蛋白的释放量,这种作用称作Bohy效应 ll.多克隆抗体是识别一个抗原的不同抗原决定簇的多种抗体的混合物。单克隆抗体由 同一个B细胞克隆合成并分泌,是一种均一的抗体,识别同一个抗原决定簇 12是一个协助新合成的多肽链正确折叠和转运的蛋白质家族。它们能够阻止部分肽段 的错误折叠,抑制新生肽链的不恰当聚集,排除与其他蛋白质的不合理结合,协助多肽链的 正确折叠和跨膜转运,协助寡聚蛋白的组装 13低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度,这种现象称为盐溶。盐溶作用主要是由 于蛋白质分子吸附某种盐类离子后,带电层使蛋白质分子彼此排斥,而蛋白质分子与水分子 间的相互作用却加强,因而溶解度增高。当离子强度增加到足够高时,很多蛋白质可以从水 溶液中沉淀出来,这种现象称为盐析。盐析作用主要是由于大量中性盐的加入使水的活度降 低,原来溶液中的大部分甚至全部的自由水转变为盐离子的结合水。盐析法沉淀出来的蛋白
（一）名词解释 1．氨基酸、蛋白质等分子既含有酸性基团，又含有碱性基团，在中性 pH 的水溶液中， 羧基等酸性基团脱去质子带负电荷，氨基等碱性基团结合质子带正电荷，这种既有带负电荷 基团，又有带正电荷基团的离子称兼性离子或两性离子，亦称偶极离子（dipolar ion） 2.调节两性离子（氨基酸、蛋白质等）溶液的 pH，使该两性离子所带的净电荷为零， 在电场中既不向正极，也不向负极移动，此时，溶液的 pH 称该两性离子的等电点（pI）。 不同结构的两性离子有不同的 pI 值。 3.构象是指具有相同结构式和相同构型的分子在空间里可能的多种形态，构象形态间的 改变不涉及共价键的破裂。一个给定的蛋白质理论上可采取多种构象，但在生理条件下，只 有一种或很少几种在能量上是有利的。 4.多亚基蛋白质一般具有多个配体结合部位，结合在蛋白质分子的特定部位上的配体对 该分子的其它部位所产生的影响(如改变亲和力或催化能力)称为别构效应。别构效应可分为 同促效应和异促效应。 5.在蛋白质中，特别是球状蛋白质中，经常可以看到由若干相邻的二级结构单远组合在 一起，彼此相互作用，形成有规则、在空间上能辩认的二级结构组合体，充当三级结构的构 件，称为超二级结构。称为超二级结构在结构的组织层次上高于二级结构，但没有构成完整 的结构域。常见的超二级结构有 ， ，Rossman 折叠， -发夹， -曲折，希腊花式拓 扑结构（Greek key topology）等。 6.蛋白质的三级结构常可区分成 1 个和数个球状区域，折叠得较为紧密，各行其功能， 称为结构域。 7.蛋白质的三级结构指肽链在二级结构，超二级结构，结构域（对分子较大，由多个结 构域的蛋白质而言）基础上形成的完整空间结构，一个三级结构单位通常由一条肽链组成， 但也有一些三级结构单位是由经二硫键连接的多条肽链组成的，如胰岛素就是由两条肽链折 叠成的 1 个三级结构单位。 8.为肽链氨基酸测序的方法。异硫氰酸苯脂与肽段氨基末端的游离 -氨基作用，再用冷 稀酸处理，氨基末端残基从肽链上脱落下来，成为异硫氰酸苯酯的衍生物，用层析的方法可 鉴定为何种氨基酸的衍生物。残留的肽链可继续与异硫氰酸苯酯作用，逐个鉴定出氨基酸的 排列顺序。 9.天然蛋白质因受物理的或化学的因素影响，其分子内部原有的高度规律性结构发生变 化，致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变，但并不导致蛋白质一级结构的破坏， 这种现象称变性作用。 10.H+和 CO2 浓度增加，会降低氧和血红蛋白的亲和力，使得血红蛋白的氧合曲线向右 移动，提高了 O2 从血红蛋白的释放量，这种作用称作 Bohy 效应。 11.多克隆抗体是识别一个抗原的不同抗原决定簇的多种抗体的混合物。单克隆抗体由 同一个 B 细胞克隆合成并分泌，是一种均一的抗体，识别同一个抗原决定簇。 12.是一个协助新合成的多肽链正确折叠和转运的蛋白质家族。它们能够阻止部分肽段 的错误折叠，抑制新生肽链的不恰当聚集，排除与其他蛋白质的不合理结合，协助多肽链的 正确折叠和跨膜转运，协助寡聚蛋白的组装。 13.低浓度的中性盐可以增加蛋白质的溶解度，这种现象称为盐溶。盐溶作用主要是由 于蛋白质分子吸附某种盐类离子后，带电层使蛋白质分子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子 间的相互作用却加强，因而溶解度增高。当离子强度增加到足够高时，很多蛋白质可以从水 溶液中沉淀出来，这种现象称为盐析。盐析作用主要是由于大量中性盐的加入使水的活度降 低，原来溶液中的大部分甚至全部的自由水转变为盐离子的结合水。盐析法沉淀出来的蛋白