上海交通大学医学院Shanghi Jiao Tong University School of Medicin一次性消化冷消化消化法温消化原代培养分次消化贴块法消化法:这种培养过程主要是采用无菌操作的方法,把组织(或器官)从动物体内取出,经酶消化处理,使分散成单个细胞,然后在人工条件下培养,使其不断地生长和繁殖
原代培养 消化法:这种培养过程主要是采用无菌操作的方法, 把组织(或器官)从动物体内取出,经酶消化处理, 使分散成单个细胞,然后在人工条件下培养,使其不 断地生长和繁殖。 消化法 贴块法 冷消化 温消化 一次性消化 分次消化
完in切取意欲培养的动物器宜或大组织块+洗去血污1原代培养方法分类剔别除多余成分贴块法消化法切成约1mm大小的植块将所取组织剪碎++用于填块培养蛋白酶溶液消化+机械方法吹打组织块不锈钢网筛过滤1对滤过液离心(<1000r/min,<10min)+用培养液浮成细胞懋液↓计数并调节细胞密度+用于分离细胞培养
贴块法 消化法
切成2~3mm小块加胰蛋白酶37℃加胰蛋白酶4℃消化1~4小时消化(6~24小日时寸)混消化广冷消化清洗静沉必可去上清加新消化液要重37℃消化时复(20~30分钟)分次消化静沉去上清滤过加营养液静沉去并吹打加培养液上清并吹打离心去上清计数接种培养消化法的分类
93 消化法的分类
上海交通大学医学院Shanghi Jiao Tong University Schoolof Medicin解离释放细胞的方法最常用的是机械解离细胞法酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法酶学解离细胞法解离细胞是体外培养动物细胞时分散组织的基本方法,最常用的消化酶是胰蛋白酶和胶原酶两种
解离释放细胞的方法 最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞 法以及螯合剂解离细胞法。 酶学解离细胞法解离细胞是体外培养动物细 胞时分散组织的基本方法,最常用的消化酶是 胰蛋白酶和胶原酶两种
海交西大学医学院miversity School of Medicinc幼龄动物动物细胞原代培剪碎组织养过程图胰蛋白酶处理细胞培养
动物细胞原代培 养过程图