冻存原理 。保护剂：甘油或二甲基亚砜(DMSO) 分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰 点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无 明显毒性。 。慢速冷冻 可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成 冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤
冻存原理 保护剂：甘油或二甲基亚砜（DMSO） 分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰 点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无 明显毒性。 慢速冷冻 可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成 冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤
杂交瘤细胞的冻存 。冻存液配方：50%小牛血清、10% DMSO、40%RPMI1640. 。冻存浓度：106~107细胞/ml。 。冻存的杂交瘤细胞应处于对数生长中期、 健康而活力好
冻存液配方：50％小牛血清、10％ DMSO、40％RPMI 1640。 冻存浓度：106 ～107 细胞/ml。 冻存的杂交瘤细胞应处于对数生长中期、 健康而活力好。 杂交瘤细胞的冻存
杂交瘤细胞冻存方法 抗原名称、细 胞编号、冻存 日期 杂交瘤细胞 密封、做好标记 细胞计数 1200rpm,5min 4℃，30min -20℃，1-2h 重悬于预冷冻存液 -70℃，过夜 1ml/管分装 ↓ 移入液氨罐 CBS
杂交瘤细胞冻存方法 杂交瘤细胞 重悬于预冷冻存液 1200rpm，5min 1ml/管分装 密封、做好标记 4℃，30min 移入液氮罐 细胞计数 抗原名称、细 胞编号、冻存 日期 -20℃，1-2h -70℃，过夜
细胞的复苏 快速融化：复苏时融解细胞速度要快，使 之迅速通过最易受损的-5℃~0℃。这样 可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融 化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内 形成胞内再结晶对细胞造成损伤
细胞的复苏 快速融化：复苏时融解细胞速度要快，使 之迅速通过最易受损的－5℃～0℃。这样 可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融 化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内 形成胞内再结晶对细胞造成损伤
杂交瘤细胞复苏方法 冻存管 1200rpm,5min 37℃水浴，震摇 弃上清 冻存液移至10ml培 细胞移至培养 养液中稀释 瓶中培养
杂交瘤细胞复苏方法 冻存管 冻存液移至10ml培 养液中稀释 37℃水浴，震摇 1200rpm，5min 弃上清 细胞移至培养 瓶中培养