2,碱水解 般用5mo/氢氧化钠煮沸10-20小时。 ●由于水解过程中许多氨基酸都受到不同 程度的破坏,产率不高。 ●部分的水解产物发生消旋化。 ●该法的优点是色氨酸在水解中不受破坏
2,碱水解 ⚫ 一般用5 mol/L氢氧化钠煮沸10-20小时。 ⚫ 由于水解过程中许多氨基酸都受到不同 程度的破坏,产率不高。 ⚫ 部分的水解产物发生消旋化。 ⚫ 该法的优点是色氨酸在水解中不受破坏
3,酶水解 目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶 ( proteolytic enzyme)或称蛋白酶 ( proteinase)已有十多种。 ●应用酶水解多肽不会破坏氨基酸,也不 会发生消旋化。水解的产物为较小的肽 段。 ●最常见的蛋白水解酶有以下几种
3,酶水解 ⚫ 目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶 (proteolytic enzyme)或称蛋白酶 (proteinase)已有十多种。 ⚫ 应用酶水解多肽不会破坏氨基酸,也不 会发生消旋化。水解的产物为较小的肽 段。 ⚫ 最常见的蛋白水解酶有以下几种:
OmO NH-CH NH-CH -NH-CH -NH-CH R 水解位点 肽链 Trypsin:R1=赖氨 酸y和精氨酸Arg CH. CHA 蛋侧链(专一性较强 NH(H一C一NH一CH一C-· 水解速度快) Any amino acid residue but Pro Bovine trypsin trypsIn NHS ASp189
⚫ Trypsin : R 1 =赖氨 酸Lys和精氨酸Arg 侧链(专一性较强, 水解速度快)。 N H C H CO R4 NH CH CO R3 NH CH CO R2 NH CH CO R1 水解位点 肽链 胰蛋白酶
NH-CH NH-CH NH-CH NH—CH 水解位点 肽链 或胰凝乳蛋白酶 糜 Chymotrypsin 蛋):R1=苯丙氨酸 Phe色氨酸Trp酪 繭氨酸Tyr;亮氨酸 Leu,蛋氨酸Met 和组氨酸His水解 稍慢
⚫ 或胰凝乳蛋白酶 (Chymotrypsin ):R1=苯丙氨酸 Phe,色氨酸Trp, 酪 氨酸Tyr; 亮氨酸 Leu,蛋氨酸Met 和组氨酸His水解 稍慢。 N H C H CO R4 NH CH CO R3 NH CH CO R2 NH CH CO R1 水解位点 肽链 糜蛋白酶
NH-CH NH-CH NH-CH NH—CH 水解位点 肽链 Pepsin:R1和R2 R1=苯丙氨酸 Phe色氨酸Trp 繭酪氨酸Tyr:亮氨 酸Leu以及其它疏 水性氨基酸水解速 度较快
⚫ Pepsin :R1 和R2 =R1=苯丙氨酸 Phe,色氨酸Trp, 酪氨酸Tyr; 亮氨 酸Leu以及其它疏 水性氨基酸水解速 度较快 。 N H C H CO R4 NH CH CO R3 NH CH CO R2 NH CH CO R1 水解位点 肽链 胃蛋白酶