通过核孔复合体的物质运输 被动扩散 协助扩散 信号介导的核输入 信号介导的核输出 胞质侧 胞质侧 胞质侧 胞质侧 核被膜 核被膜 核被膜 核被膜 示意图 核质侧 核质侧 核质侧 核质侧 M,<-5×104 ●核输入物 。核输出物 说明 ● M,>-5×104 ● 核孔作用蛋白 G 核输入受体载体 中央栓（转运体） (核输曲受体我体 。4℃时不被抑制 。4℃时被抑制 。需要核定位信号序列 。需要核输出信号序列 。不需要提供能量 。不需要提供能量 。需要核定位信号序列受体。需要核输出信号序列受体 ·最大转运物M,为5×10 。需要与NPC相互作用 载体 载体 特点 。无明显大小限制 。在研究过的情况中，似乎。在研究过的情况中，似乎 不需要核苷酸水解 不需要核苷酸水解 4℃时被抑制 。4℃时被抑制
通过核孔复合体的物质运输
1.通过核孔复合体的被动扩散 CYTOSOL size of molecules that enter nucleus by free diffusion NUCLEUS size of macromolecules 50nm that enter nucleus by active transport
1．通过核孔复合体的被动扩散
2.核孔复合体的主动运输 Transcription and RNA processing Chromosome replication DNA OOS①N rRNA mRNA tRNA Ribosomal subunits NUCLEUS Proteins needed for transcription Ribosomal proteins Protein synthesis Proteins needed tRNA Growing for chromosome polypeptide replication Ribosome mRNA CYTOSOL Completed protein
2．核孔复合体的主动运输
爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验() Nucleoplasmin Core pentamer pentamer Altered 大 核质蛋白入核是 nucleoplasmin 大 or Tail fragment 否由分子大小决 Inject into Inject into cytosol cytosol 定呢？ Frog oocyte Incubate (a)Nucleus (b)Cytosol
核质蛋白入核是 否由分子大小决 定呢？ 爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验（1）
爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验(1) colloidal gold limited proteolysis 核质蛋白哪部分负 tail head 责其在核内定位？ radioactive radioactive radioactive colloidal gold particle nucleoplasmin heads tails coated with tails MICROINJECTION INTO CYTOSOL OF XENOPUS OOCYTE ●该实验如何证明其 入核是由核定位信 号指导的主动运输， INCUBATION DETECTION BY AUTORADIOGRAPHY DETECTION BY EM 而不是被动扩散？ cytoplasm nuclea UPTAKE INTO NO UPTAKE INTO NUCLEUS UPTAKE NUCLEUS UPTAKE INTO NUCLEUS THROUGH NUCLEAR PORES
⚫ 核质蛋白哪部分负 责其在核内定位？ ⚫ 该实验如何证明其 入核是由核定位信 号指导的主动运输， 而不是被动扩散？ 爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验（1）