质粒DNA的提取和鉴定
质粒DNA的提 取和鉴定
实验目的实验原理实验仪器和试剂一实验步骤四注意事项五思考题六
实验目的 实验原理 实验仪器和试剂 实验步骤 一 二 三 四 注意事项 思考题 五 六
一、实验自的心了解质粒的基本特性和其应用；心掌握碱裂解法提取质粒DNA的基本原理和实验方法
一、实验目的 ❖了解质粒的基本特性和其应用； ❖掌握碱裂解法提取质粒DNA的基本原理和实验方法
二、基本原理细菌细菌染色体A1.质粒DNAM轮心质粒是存在于细菌染色体之外的小型环状双链DNA分子：心质粒具有复制起始区，能独立自1umR主的复制，且在细菌中的拷贝数DNA少的有1～2个，多达10个以上；心质粒具有抗生素抗性基因等，可大肠杆菌细胞质粒赋予细菌相应的表型，抗菌素抗性基因控制质粒DNA转移的基因
二、基本原理 ❖质粒是存在于细菌染色体之外的 小型环状双链DNA分子； ❖质粒具有复制起始区，能独立自 主的复制，且在细菌中的拷贝数 少的有1～2个，多达10个以上； ❖质粒具有抗生素抗性基因等，可 赋予细菌相应的表型。 1. 质粒DNA
2.质粒DNA-pTA2-basic和pTA2-p53ori抗生素基因：AmpA多克隆位点：MCSlac复制起始点：oriAmpKpnl-EcoRIPTA2其它：lac操纵子和XMCS2981bpEcoRIlac基因SacllacpromoterpUCori
❖ 抗生素基因：Amp ❖ 多克隆位点：MCS ❖ 复制起始点：ori ❖ 其它：lac操纵子和 lac基因 2. 质粒DNA-pTA2-basic和pTA2-p53