TLPs的失活曲线10010204060080100120140160180Time(minutes)
TLPs 的失活曲线
TLP-ste突变蛋白的三维结构
TLP-ste突变蛋白的三维结构
酶拓扑结构的变化SArg7H2Glu20aH3H1
酶拓扑结构的变化
蛋白质的耐热机制天然耐热蛋白质特性:减少内腔体积:引入盐桥束:减少表面积/体积比:除去氧化还原活性基:埋藏暴露的疏水基:除去支链氨基酸:除去能脱氨基的氨基酸所有耐热蛋白质的氨基酸同源性低至36%,最高不超过75%。分子进化耐热蛋白质特性:邻-硝基苯酯酶突变体8g8手(p-nitrobenzylesterase)的了稳定性提高了17°C,但突变的氨基酸数仅有13个,与天然酯酶同源性高达97%
蛋白质的耐热机制 • 天然耐热蛋白质特性: 减少内腔体积;引入盐桥束;减少表面积/体积比; 除去氧化还原活性基;埋藏暴露的疏水基;除去 - 支链氨基酸;除去能脱氨基的氨基酸。 所有耐热蛋白质的氨基酸同源性低至36%,最高不 超过75%。 • 分子进化耐热蛋白质特性: 邻-硝基苯酯酶(p-nitrobenzyl esterase)突变体8g8 的了稳定性提高了17C,但突变的氨基酸数仅有13 个,与天然酯酶同源性高达97%
基因直接进化的步骤·突变基因突变库的建立·筛选基因突变库的活体或离体筛选基因复制与遗传
基因直接进化的步骤 • 突变 基因突变库的建立 • 筛选 基因突变库的活体或离体筛选 • 基因复制与遗传