MHC主要组织相关性抗原(HLA) HLA复合体位于第6号染色体短 臂上大约4000kb范围内，由一 人类HLA复合体（第6号染色体）： 群密切连锁的基因组成。 DP DN DM LMP TAPDO DO DR R C4 Bf C2 TNF B CEA G F 多基因性：基因复合体由多个紧 密相邻的基因座位组成，其编码 产物具有相同或相似的功能。 MHC-II MHCⅡ MHC-I 4000kb范围内，由一群密切连 锁的基因组成。HLA复合体是迄 今已知的人体最复杂的基因体系
MHC 主要组织相关性抗原（HLA) HLA复合体位于第6号染色体短 臂上大约4000kb范围内，由一 群密切连锁的基因组成。 多基因性:基因复合体由多个紧 密相邻的基因座位组成，其编码 产物具有相同或相似的功能。 4000kb范围内，由一群密切连 锁的基因组成。HLA复合体是迄 今已知的人体最复杂的基因体系
3.总结：抗体功能基因组成 免疫相关基因： 与免疫成熟相关的精细免疫调控 1.不同类型的重链和轻链，如H,入，K, 所需的顺式作用元件 μ，Y等。与类别转换和亲和力成熟相 关的区域。 ·内含子及下游增强子原件 2.主要的组织相容性复合物，如MHCI、 ●转换区调控序列 Ⅱ； ●外显子两端保守序列 3.CD抗原，如CD7,CD23,CD89,CD59 等等。 。免疫相关调控基因 4.其他基因，如协同刺激因子B71CD28 ·①指导抗体基因片段进行转座重排的基因 等等 ·②指导产生记忆免疫细胞的基因 关注这些基因与宿主小鼠免疫体系的兼容 性；
3.总结：抗体功能基因组成 免疫相关基因： 1. 不同类型的重链和轻链，如H，λ，κ， μ，γ等。与类别转换和亲和力成熟相 关的区域。 2. 主要的组织相容性复合物，如MHCⅠ、 Ⅱ； 3. CD抗原，如CD7,CD23,CD89,CD59 等等。 4. 其他基因，如协同刺激因子B7/CD28 等等 ○ 关注这些基因与宿主小鼠免疫体系的兼容 性； 与免疫成熟相关的精细免疫调控 所需的顺式作用元件 内含子及下游增强子原件 转换区调控序列 外显子两端保守序列 ○ 免疫相关调控基因 ● 指导抗体基因片段进行转座重排的基因 ● 指导产生记忆免疫细胞的基因
四、自身g基因敲 除小鼠的构建 mlg -/
四、自身Ig基因敲 除小鼠的构建 mIg -/-
1.构建自身1g 基因剔除小鼠 DxII IXXI 的原因 KIX X △JH ACK 小鼠内源性Ig基 因的存在，将导致 为了让小鼠的免疫系统充分动员生产人抗体， 在抗原刺激的时候， 因此必须抑制内源性鼠抗体的生成。 优先产生鼠源性抗 体。 通过基因打靶技术，精确，干净地抑制内源性 Ig基因的表达
1.构建自身Ig 基因剔除小鼠 的原因 小鼠内源性Ig基 因的存在，将导致 在抗原刺激的时候， 优先产生鼠源性抗 体。 为了让小鼠的免疫系统充分动员生产人抗体， 因此必须抑制内源性鼠抗体的生成。 通过基因打靶技术，精确，干净地抑制内源性 Ig基因的表达
Inserted DNA Vector neor HSV-张 2.利用基因打靶技术剔除小鼠内源性g基因 Homologous DNA Homologous DNA Construction of targeting vector The vector contains pieces of DNA that are homologous to the target gene,as well as inserted DNA which changes 在同源重组基础上，利用正反向双筛的方法 the target gene and allows for positive-negative selection. 获得正确重组的细胞克隆。 ES cell transfection 准确敲除内源性（鼠源性）抗体基因 The cellular machinery for homologous recombination allows the targeting vector enables the target vector to find and recombine with the target gene. Vector Conventional Knockout HSV-tk Targeting 二 Vector Target gene Exon1 Exon3 Wildtype Allele Homologous rocombenation Targeted Allele Exon1 Exon3 Targeted gene
2.利用基因打靶技术剔除小鼠内源性Ig基因 在同源重组基础上，利用正反向双筛的方法 获得正确重组的细胞克隆