基因断技术分类 1. Molecular hybridization: Southern northern dot blot 2、PCR 3、DNA测序 4、DNA芯片技术
基因诊断技术分类 1、Molecular hybridization： Southern, Northern, dot blot, 2、PCR 3、DNA测序 4、DNA芯片技术
1.拨酸分子亲敦 Molecular hybridization Southern blot -DNA Northern blot--RNA Dot blot In Situ hybridization
1. 核酸分子杂交 Molecular hybridization • Southern blot——DNA • Northern blot——RNA • Dot blot， • In Situ Hybridization
核酸杂立的基本原醒: 利用核酸变性和复性理论:(1)双链 DNA分子在某些理化因素作用下解旋 条件恢复后又可恢复其双螺旋结构; (2)具有互补碱基序列的异源核酸单 链之间同样可按碱基互补配对原则通 过氢键结合为双链
核酸杂交的基本原理： 利用核酸变性和复性理论：（1）双链 DNA分子在某些理化因素作用下解旋， 条件恢复后又可恢复其双螺旋结构； （2）具有互补碱基序列的异源核酸单 链之间同样可按碱基互补配对原则通 过氢键结合为双链
核酸分子杂交的流程示意图 待测核酸制备 制备探针核酸片段 滤膜上核酸固化 探针标记 杂交 加入标记核酸探针 去除未参与杂交的探针 检测杂交信号
核酸分子杂交的流程示意图 • 待测核酸制备 滤膜上核酸固化 杂 交 去除未参与杂交的探针 检 测 杂 交 信 号 • 制备探针核酸片段 探 针 标 记 加入标记核酸探针
探针的种类 DNA探针:基因组DNA探针;基因探针 cDNA探针:目前应用最广泛的 寡核苷酸探针( Oligonucleotide probes) RNA探针
探针的种类 • DNA 探针:基因组DNA探针;基因探针 • cDNA探针:目前应用最广泛的 • 寡核苷酸探针(Oligonucleotide probes) • RNA 探针: