不同的探针在应用中有各自的特点,但最 重要的是探针的序列选择.而探针序列又是依 据待测核酸序列选择的。 对致病性微生物应选用其最保守、最特 异的序列;对突变基因的检测,应用含有突 变位点的序列或待测基因编码的mRNA序
不同的探针在应用中有各自的特点,但最 重要的是探针的序列选择.而探针序列又是依 据待测核酸序列选择的。 对致病性微生物应选用其最保守、最特 异的序列；对突变基因的检测，应用含有突 变位点的序列或待测基因编码的ｍＲＮＡ序 列
探针的标陀物 放射性标记物 ☆32P,35S,125I,3H 非放射性标记物 生物素,地高辛,荧光素,酶,金属
探针的标记物 • 放射性标记物 ❖32P， 35S， 125I， 3H • 非放射性标记物 ❖生物素，地高辛，荧光素， 酶， 金属
Southern blot AF典 N TTNT T Praz w ro DNA tere 比
Southern blot N N T T N T T
1、 Southern blot:用于DNA检测,不但能检测出特异 的DNA片段,还能进行定位和测定分子量,可用于基因的 限制性内切酶图谱分析、基因突变分析等。 2、 Northern blot:杂交用于RNA检测,能对组织细胞 中的总RNA或皿RNA进行定性和定量分析。 3、 dot blot:既可检测DNA也或检测RNA,用于基因组 中特定基因及其表达的定性和定量分析。缺点:特异性 较低,不能鉴定所分析的基因分子量。 4、原位杂交:在组织、细胞和染色体水平作核酸定性 和定量分析,并可定位
1、Southern blot：用于DNA检测，不但能检测出特异 的DNA片段，还能进行定位和测定分子量，可用于基因的 限制性内切酶图谱分析、基因突变分析等。 2、Northern blot：杂交用于RNA检测，能对组织细胞 中的总RNA或mRNA进行定性和定量分析。 3、dot blot：既可检测DNA也或检测RNA，用于基因组 中特定基因及其表达的定性和定量分析。缺点：特异性 较低，不能鉴定所分析的基因分子量。 4、原位杂交：在组织、细胞和染色体水平作核酸定性 和定量分析，并可定位
(二)PCR技术是基因诊断的一种基础技术 cycle I 变性 PCR是在试管内 退火 利用DNA聚合酶 延伸 催化的反应反复 进行同一段DNA 片段合成的过程 cycle 3
PCR是在试管内 利用DNA聚合酶 催化的反应反复 进行同一段DNA 片段合成的过程 （二）PCR技术是基因诊断的一种基础技术