想一想 1.前面讲过的反义RNA的作用是什么? 2.DNA的正义链和反义链是什么? 3.如果给生物体从外源注入反义RNA会不会 抑制mRNA的翻译从而抑制基因表达呢?
1.前面讲过的反义RNA的作用是什么? 2. DNA的正义链和反义链是什么? 3.如果给生物体从外源注入反义RNA会不会 抑制mRNA的翻译从而抑制基因表达呢? 想一想
四、RNA干扰 (RNA interference,RNAi) 与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA) 所诱导的一种特异性基因沉默现象。 ■RNA干扰的发现 ■RNA干扰的作用机制 ■RNA干扰的应用
四、RNA 干扰 (RNA interference,RNAi) 与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA) 所诱导的一种特异性基因沉默现象。 ◼ RNA干扰的发现 ◼ RNA干扰的作用机制 ◼ RNA干扰的应用
发现: ·1998年,华盛顿卡耐基研究院的Fire等发现 将ds RNA注入秀丽线虫可显著抑制特定基因 ■制备高度纯化的RNA,发现: 正义RNA无基因抑制作用 反义RNA的基因抑制作用也很微弱, 而用纯化后的dsRNA注入线虫,却能高效、特异地阻断相 应基因的表达。 ■实验证明dsRNA抑制基因的表达的效率比纯化后的反义 RNA至少高几个数量, 他们称此现象为ds RNA介导的RNA干扰(RNAi)
发现: • 1998年,华盛顿卡耐基研究院的Fire等发现 将ds RNA注入秀丽线虫可显著抑制特定基因 ◼ 的表达。 制备高度纯化的RNA,发现: 正义RNA无基因抑制作用 反义RNA的基因抑制作用也很微弱, 而用纯化后的dsRNA注入线虫,却能高效、特异地阻断相 应基因的表达。 ◼ 实验证明dsRNA抑制基因的表达的效率比纯化后的反义 RNA至少高几个数量 , ◼ 他们称此现象为ds RNA介导的RNA干扰(RNAi)
RNAi现象的普遍性 ·1999,RNAi作用机制模型的提出。 2001,RNAi技术成功诱导培养的哺乳动物细 胞基因沉默现象。 随后陆续发现RNA也存在于水稻、烟草、 果蝇、小鼠及人等几乎所有的真核生物中
RNAi现象的普遍性 • 1999,RNAi作用机制模型的提出。 • 2001,RNAi技术成功诱导培养的哺乳动物细 胞基因沉 默现象。 随后陆续发现RNAi也存在于水稻、烟草、 果蝇、小鼠及人等几乎所有的真核生物中
RNAi的作用机制 RNAi是由dsRNA诱导的多步骤、多因素参与 过程,其中需要ATP参与。 整个过程可能分为三步: ·SiRNA形成 ·RISC的形成 ·靶mRNA的切割降解
RNAi的作用机制 整个过程可能分为三步: • siRNA形成 • RISC的形成 • 靶mRNA的切割降解 RNAi是由dsRNA诱导的多步骤、多因素参与 过程,其中需要ATP参与