二、实验原理 2.荧光检测器 >物质的分子或原子经光照射后,有些电子被激发至较高的能级,这些电子 从高能级跃至低能级时,物质会发出比入射光波长较长的光,这种光称为荧 光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的强弱 >在样品浓度足够低时,荧光强度与入射光强度、量子效率及样品浓度成线 性关系 >喹诺酮类药物、芳香族化合物,如有机胺、维生素、激素、酶 >优点:非常高的灵敏度和良好的选择性,灵敏度要比紫外检测法高2-3个数 量级。而且所需样品量很小,特别适合于药物和生物化学样品的分析 >缺点:对样品的选择性较强;其它与紫外检测器相似
2. 荧光检测器 物质的分子或原子经光照射后,有些电子被激发至较高的能级,这些电子 从高能级跃至低能级时,物质会发出比入射光波长较长的光,这种光称为荧 光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的强弱 在样品浓度足够低时,荧光强度与入射光强度、量子效率及样品浓度成线 性关系 喹诺酮类药物、芳香族化合物,如有机胺、维生素、激素、酶 优点:非常高的灵敏度和良好的选择性,灵敏度要比紫外检测法高2-3个数 量级。而且所需样品量很小,特别适合于药物和生物化学样品的分析 缺点:对样品的选择性较强;其它与紫外检测器相似 二、实验原理
二、 实验原理 3.电化学检测器 >根据电化学原理和物质的电化学性质进行检测的,对具有氧化还原性质的 化合物,如含硝基、氨基等有机化合物及无机阴、阳离子等物质可采用电化 学检测器 >可分为极谱、库仑、安培和电导检测器等。 前三种统称为伏安检测器,用于具有氧化还原性质的化合物的检测, 电导检测器主要用于离子检测。 安培检测器应用较广泛,更以脉冲式安培检测器最为常用
3. 电化学检测器 根据电化学原理和物质的电化学性质进行检测的,对具有氧化还原性质的 化合物,如含硝基、氨基等有机化合物及无机阴、阳离子等物质可采用电化 学检测器 可分为极谱、库仑、安培和电导检测器等。 前三种统称为伏安检测器,用于具有氧化还原性质的化合物的检测, 电导检测器主要用于离子检测。 安培检测器应用较广泛,更以脉冲式安培检测器最为常用 二、实验原理
二、实验原理 4.示差折光检测器 >基于样品组分的折射率与流动相溶剂折射率有差异,当组分洗 脱出来时,会引起流动相折射率的变化,这种变化与样品组分的 浓度成正比 >对于那些无紫外吸收的有机物(如高分子化合物、糖类、脂肪 烷烃)是比较适合的。在凝胶色谱中是必备检测器,在制备色谱 中也经常使用 >缺点:灵敏度很低;不能用于梯度洗脱系统
4. 示差折光检测器 基于样品组分的折射率与流动相溶剂折射率有差异,当组分洗 脱出来时,会引起流动相折射率的变化,这种变化与样品组分的 浓度成正比 对于那些无紫外吸收的有机物(如高分子化合物、糖类、脂肪 烷烃)是比较适合的。在凝胶色谱中是必备检测器,在制备色谱 中也经常使用 缺点:灵敏度很低;不能用于梯度洗脱系统 二、实验原理
二、 实验原理 5.蒸发光散射检测器 >基于溶质的光散射性质 >色谱柱流出液进入雾化器形成微小液滴,与通入的气体(通常是氮气,有 时也用空气)混合均匀,经过加热的漂移管,蒸发除去流动相 >能检测不含发色团的化合物,如:碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂 肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物,并在没有标准品和化合物结构参数未知 的情况下检测未知化合物 >响应不依赖于样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测, 不受其官能团的影响 >响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物
5. 蒸发光散射检测器 基于溶质的光散射性质 色谱柱流出液进入雾化器形成微小液滴,与通入的气体 (通常是氮气,有 时也用空气)混合均匀,经过加热的漂移管,蒸发除去流动相 能检测不含发色团的化合物,如:碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂 肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物,并在没有标准品和化合物结构参数未知 的情况下检测未知化合物 响应不依赖于样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测, 不受其官能团的影响 响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物 二、实验原理
二、实验原理 6.化学发光检测器 >基于某些物质在常温下进行化学反应,生成处于激发态势反应中间体或反 应产物,当它们从激发态返回基态时,就会发射出光子。由于物质激发态的 能量是来自化学反应,所以叫做化学发光 >当分离组分从色谱柱中洗脱出来后,立即与适当的化学发光试剂混合,引 起化学反应,导致发光物质产生辐射,其光强度与该物质的浓度成正比 >优点:快速、灵敏、设备简单、价廉、线性范围宽
6. 化学发光检测器 基于某些物质在常温下进行化学反应,生成处于激发态势反应中间体或反 应产物,当它们从激发态返回基态时,就会发射出光子。由于物质激发态的 能量是来自化学反应,所以叫做化学发光 当分离组分从色谱柱中洗脱出来后,立即与适当的化学发光试剂混合,引 起化学反应,导致发光物质产生辐射,其光强度与该物质的浓度成正比 优点:快速、灵敏、设备简单、价廉、线性范围宽 二、实验原理