基因的新概念 移动基因( movable gene)又叫转位因子 ( transposable elements),可以在染色体基因 组上移动,甚至可在不同染色体间跃迁,故又 称跳跃基因( Jumping gene),后来称其为 Insertion sequences(现在一般叫 IS elements)。 现在已发现在细菌中存在着三种类型的转位因 子,相对分子质量小于2000bp的一般叫插入序 列(IS),大于2000bp的称为转位子 ( Transposon,Tn),第三种类型为噬菌体Mu 和D108
基因的新概念 • 移动基因（movable gene）又叫转位因子 （transposable elements），可以在染色体基因 组上移动，甚至可在不同染色体间跃迁，故又 称跳跃基因（jumping gene），后来称其为 insertion sequences（现在一般叫IS elements）。 现在已发现在细菌中存在着三种类型的转位因 子，相对分子质量小于2000bp的一般叫插入序 列（IS），大于2000bp的称为转位子 （Transposon，Tn），第三种类型为噬菌体Mu 和D108
2、基因工程中常用的工具酶 基因的重组与分离涉及一系列相互关联的酶促反应 在众多的核酸酶中,限制性核酸内切酶(又称限制 酶, restriction enzyme)和DNA连接酶( ligase)的 发现和应用,才真正使分子的体外切割和连接成为 可能 限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中 的某种特定核苷酸序列,并由此切割双链DNA双链 结构的核酸内切酶。它们主要是从原核生物中分离 纯化出来的。 在核酸内切酶的作用下,侵入细菌的“外源DNA分 子被切割成不同大小的片段,而细菌本身的DNA由 于修饰酶的保护作用,可免于自身限制酶的降解
2、基因工程中常用的工具酶 • 基因的重组与分离涉及一系列相互关联的酶促反应。 在众多的核酸酶中，限制性核酸内切酶（又称限制 酶，restriction enzyme）和DNA连接酶（ligase）的 发现和应用，才真正使分子的体外切割和连接成为 可能。 • 限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中 的某种特定核苷酸序列，并由此切割双链DNA双链 结构的核酸内切酶。它们主要是从原核生物中分离 纯化出来的。 • 在核酸内切酶的作用下，侵入细菌的“外源DNA分 子被切割成不同大小的片段，而细菌本身的DNA由 于修饰酶的保护作用，可免于自身限制酶的降解
限制性核酸内切酶分类和命名 分类:即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型酶 主要特性 Ⅰ型 Ⅱ型 Ⅲ型 、限制和修饰作单一多功能的酶分开的核酸内切酶具有一种共同亚基 用 和甲基化酶 的双功能酶 2、限制酶的蛋白3种不同的酶 单一的成分 2种不同的亚基 结构 3、限制作用所需ATP、mg2、S-腺|mg2 ATP、mg2+(S-腺 辅助因子 苷甲硫氨酸 苷甲硫氨酸) 4、切割位点可能随机切割位于寄主特异性位距寄主特异性位点 点或其附近 3端24~26bp 5、序列特异性的不是 是 是 切割 6、在DNA克隆中无用 非常有用 有用 的用处
限制性核酸内切酶分类和命名 • 分类：即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型酶 主要特性 Ⅰ型 Ⅱ型 Ⅲ型 1、限制和修饰作 用 单一多功能的酶 分开的核酸内切酶 和甲基化酶 具有一种共同亚基 的双功能酶 2、限制酶的蛋白 结构 3种不同的酶 单一的成分 2种不同的亚基 3、限制作用所需 辅助因子 ATP、mg2+ 、S- 腺 苷甲硫氨酸 mg2+ ATP、mg2+（S- 腺 苷甲硫氨酸） 4、切割位点 可能随机切割 位于寄主特异性位 点或其附近 距寄主特异性位点 3'端24~26bp 5、序列特异性的 切割 不是 是 是 6、在DNA克隆中 的用处 无用 非常有用 有用