级美 fmltetnn 54 mRNA的互补链,负对照,mRNA的正对照,UBQ10 杂交信号集中于同义链,无杂交杂交信号遍布于 纤维细胞中。 信号 整个胚珠。 nlpe& PgE
mRNA的互补链， 杂交信号集中于 纤维细胞中。 负对照，mRNA的 同义链, 无杂交 信号。 正对照，UBQ10 杂交信号遍布于 整个胚珠
级美 荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization, FISH) 首先对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记, 然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定 的序列结合,再通过与荧光素分子相耦联的 单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的 位置。 nlPE& PgE
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH). 首先对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记， 然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定 的序列结合，再通过与荧光素分子相耦联的 单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的 位置
级美 6.1.4基因定点突变(site- directed mutagenesis) 通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所 编码的氨基酸序列,用于研究某个(些)氨 基酸残基对蛋白质的结构、催化活性以及结 合配体能力的影响,也可用于改造DNA调控 元件特征序列、修饰表达载体、引入新的酶 切位点等。 nlpe& PgE
6. 1. 4 基因定点突变(site-directed mutagenesis). 通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所 编码的氨基酸序列，用于研究某个（些）氨 基酸残基对蛋白质的结构、催化活性以及结 合配体能力的影响，也可用于改造DNA调控 元件特征序列、修饰表达载体、引入新的酶 切位点等
诱变寡核苷酸引物 图6-6寡核 应用DNA聚合酶延 含单拷贝野生型靶序列 伸诱变寡核苷酸引物 的单链重组M13DNA 苷酸介导的 DNA突变技 术 转染大肠杆菌, 筛选携带突变体 克隆的M13噬菌斑 纯化待筛克隆序列 分析验证突变体 AGGCGGCTACGTGGCCT AGGCGGCTAGGTGGCCT nlpe& Pge
图6-6 寡核 苷酸介导的 DNA 突 变 技 术
级美 目前,主要采用两种PCR方法,重叠延伸技 术和大引物诱变法,在基因序列中进行定点 突变。 nlPE& PgE
目前，主要采用两种PCR方法，重叠延伸技 术和大引物诱变法，在基因序列中进行定点 突变