第一个用于基因克隆的天然质粒 pSC101，它含有一个EcoR 酶切位点， 一个四环素抗性选择记号（Tetr ），插 入外源片断后不影响其复制功能，但该 质粒分子量较大，拷贝数低只具有抗菌 素抗性基因，无法使用插入失活技术选 择重组分子
第一个用于基因克隆的天然质粒 pSC101，它含有一个EcoR 酶切位点， 一个四环素抗性选择记号（Tetr ），插 入外源片断后不影响其复制功能，但该 质粒分子量较大，拷贝数低只具有抗菌 素抗性基因，无法使用插入失活技术选 择重组分子
ColE1质粒在其唯一的单切割位点 EcoRl中克隆外源DNA片断后，可根据对 大肠杆菌素E1的免疫性选择转化子，不 能合成大肠杆菌素E1的菌落是具有重组 质粒的转化子。但对大肠杆菌素E1的免 疫筛选，在化学上是相当麻烦的
ColE1质粒在其唯一的单切割位点 EcoRl中克隆外源DNA片断后，可根据对 大肠杆菌素E1的免疫性选择转化子，不 能合成大肠杆菌素E1的菌落是具有重组 质粒的转化子。但对大肠杆菌素E1的免 疫筛选，在化学上是相当麻烦的
2.质粒载体必须具备的基本条件 (1) 、具有复制起点； 自我增值的基本条件，一般具一个复制子。 (2) 、具有抗菌素抗性； 理想的质粒载体具有两种抗菌素抗性基因。 (3) 、具有若干限制酶切单一位点（CMS）； (4) 、具有较小的分子量和较高的拷贝数。 低分子量的质粒易于操作，克隆外源片断 后仍能有效的转化给受体细胞同时低分子量 的质粒对限制酶具有多重识别位点的几率也较低； 较高的拷贝数可获得大量的克隆基因
2.质粒载体必须具备的基本条件 (1) 、具有复制起点； 自我增值的基本条件，一般具一个复制子。 (2) 、具有抗菌素抗性； 理想的质粒载体具有两种抗菌素抗性基因。 (3) 、具有若干限制酶切单一位点（CMS）； (4) 、具有较小的分子量和较高的拷贝数。 低分子量的质粒易于操作，克隆外源片断 后仍能有效的转化给受体细胞同时低分子量 的质粒对限制酶具有多重识别位点的几率也较低； 较高的拷贝数可获得大量的克隆基因
以Amp r 和 Tet r为选择 性标记， 克隆位点 在这两个 选择性标 记的单酶 切位点上。 选择 Amp rTet s 或 Amp sTet r （4363bp ） 的重组子
以Amp r 和 Tet r为选择 性标记， 克隆位点 在这两个 选择性标 记的单酶 切位点上。 选择 Amp rTet s 或 Amp sTet r （4363bp ） 的重组子
3.质粒载体的选择记号 新陈代谢特性； 对大肠杆菌素E1的免疫性； 抗菌素抗性； 四环素抗性、氨苄青霉素抗性、 链霉素抗性、卡那霉素抗性 大多数质粒本身带有抗菌素基因； 抗菌素抗性记号便于操作、易于选择
3.质粒载体的选择记号 新陈代谢特性； 对大肠杆菌素E1的免疫性； 抗菌素抗性； 四环素抗性、氨苄青霉素抗性、 链霉素抗性、卡那霉素抗性 大多数质粒本身带有抗菌素基因； 抗菌素抗性记号便于操作、易于选择