(二)单向免疫扩散( single radial immunodiffusion 原理ε抗体预先与琼脂混匀制成凝胶板 打孔,降可溶性抗原加至孔中,向周围扩散 与抗体在比例适宜处形成白色沉淀环。沉淀 环的直径与抗原浓度呈正相关。根据沉淀环 直径大小从预先绘制成的标准曲线,查出待 测标本中抗原含量。 优点:定量测定抗原,方法简便,易观 察结果。 灵敏度:1~20μg/ml 缺点:需时长,1~2厌观察结果。 应用:常用于血清中lgG、lgM、lgA和C3 的定量检测
(二)单向免疫扩散(single radial immunodiffusion) 原理:抗体预先与琼脂混匀制成凝胶板, 打孔,•将可溶性抗原加至孔中,向周围扩散, 与抗体在比例适宜处形成白色沉淀环。沉淀 环的直径与抗原浓度呈正相关。根据沉淀环 直径大小从预先绘制成的标准曲线,查出待 测标本中抗原含量。 优点:定量测定抗原,方法简便,易观 察结果。 灵敏度:1~20μg/ml。 缺点:需时长,1~2•天观察结果。 •应用:常用于血清中IgG、IgM、IgA和C3 的定量检测
含抗体凝胶 沉淀环 抗原浓度 单向免疫扩散试验
(三)对流免疫电泳{ counter immunoelectrophoresis 原理:在电场中进行双向免疫扩散。 加抗原孔靠近阴极,加抗体孔靠近阳极 通电(缓冲液pH8.6)后,抗原向阳极永动,抗 体向阴极泳动,二者在比例适宜处形成百色沉 淀线。 特点:出结果快于双向免疫扩散,约需1小时; 灵敏度:10μg/ml
(三)对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis) 原理:在电场中进行双向免疫扩散。 加抗原孔靠近阴极,加抗体孔靠近阳极。 通电(缓冲液pH 8.6)后,抗原向阳极泳动,抗 体向阴极泳动,二者在比例适宜处形成白色沉 淀线。 特点:出结果快于双向免疫扩散,约需1小时; 灵敏度:10μg/ml
Ag Ab Ag A O⊙ 对流免疫电泳
(四)火箭电泳( rocket electrophoresis,又 称电免疫扩散 原理:在电场中进行单向免疫扩散。 抗原在含抗体的琼脂中泳动,二者于比 例适宜处形成沉淀峰。沉淀峰的高度与抗原 含量成正比。从参考曲线查出抗原含量。 敏感度:1~20μg/m 优点:需时较短。 应用:测定抗原含量
(四)火箭电泳(rocket electrophoresis,又 称电免疫扩散) 原理:在电场中进行单向免疫扩散。 抗原在含抗体的琼脂中泳动,二者于比 例适宜处形成沉淀峰。沉淀峰的高度与抗原 含量成正比。从参考曲线查出抗原含量。 敏感度: 1~20μg/ml 优点:需时较短。 应用:测定抗原含量