DNA的修饰 ☆是什么限制了X一B噬菌体在菌株A中的繁殖呢? 是由于宿主的一种核酸酶的作用,它能将噬菌体 DNA切成许多无感染力的片段,宿主细胞具有破坏其 陌生DNA的防卫系统。 ☆怎样保护宿主自身的DNA和感染性X一A噬菌体DNA免受宿 主核酸酶的攻击? 有一种酶能在特定序列上修饰特异性碱基,但是并 不改变这些碱基的编码性质。如在胞嘧啶和腺嘌呤上 增加一个甲基后就能保护DNA免受核酸酶的攻击,该 过程称甲基化作用( methylation)
二、DNA的修饰 ☆是什么限制了X－B噬菌体在菌株A中的繁殖呢？ 是由于宿主的一种核酸酶的作用，它能将噬菌体 DNA切成许多无感染力的片段，宿主细胞具有破坏其 陌生DNA的防卫系统。 ☆怎样保护宿主自身的DNA和感染性X－A噬菌体DNA免受宿 主核酸酶的攻击？ 有一种酶能在特定序列上修饰特异性碱基，但是并 不改变这些碱基的编码性质。如在胞嘧啶和腺嘌呤上 增加一个甲基后就能保护DNA免受核酸酶的攻击，该 过程称甲基化作用（methylation）
在宿主限制现象中有两个相互的过程: (1)由于宿主核酸酶的作用破坏了侵入 的噬菌体DNA,从而限制了噬菌体的繁 殖 (2)噬菌体DNA修饰免除了限制酶的 作用。 Bacterium a has the capacity to modify dna whereas b does not
•在宿主限制现象中有两个相互的过程： （1）由于宿主核酸酶的作用破坏了侵入 的噬菌体DNA，从而限制了噬菌体的繁 殖； （2）噬菌体DNA修饰免除了限制酶的 作用。 Bacterium A has the capacity to modify DNA whereas B does not
限制酶的特异性 1970年, Hamilton smith从流感嗜血杄菌d株分离到能识别特 定核苷酸序列,切点专一的限制酶一 HindI 5-G-T-Py-Pu-A-C-3 Py: pyrimidine 3-C-A-PuPy-T-G-5 Pu: purine Smithi进一步证明宿主诱导的甲基化作用保护了具有同样序列 的DNA免受Himd的切制: 5-GTPy-PuA-C-3 3-C-A-Pu-Py-T-G-5
三、限制酶的特异性 1970年，Hamilton Smith从流感嗜血杆菌d株分离到能识别特 定核苷酸序列，切点专一的限制酶－HindII ↓ 5’－G－T－Py－Pu－A－C－3’ 3’－C－A－Pu－Py－T－G－5’ ↑ Smith进一步证明宿主诱导的甲基化作用保护了具有同样序列 的DNA免受HindII的切割： ↓ m 5’－G－T－Py－Pu－A－C－3’ 3’－C－A－Pu－Py－T－G－5’ m ↑ * * Py：pyrimidine Pu：purine
E.cOli的R质粒的一个基因产生的限制酶 ECORI,它对SV4 病毒的环状DNA分子上只有一个切点 口■口口口口■口 5-G-A-A-T-T-C-3 ■口口口■■ 3—C-T—T-A-A+G-5… 上述序列是旋转对称的。由于切点是错开的,因此使SV40 的环状分子切开成具有粘性末端( sticky ends)的线状分子 上述序列中腺嘌呤的甲基化也能保护DNA免受ECOR的切割
• E.coli的R质粒的一个基因产生的限制酶EcoRI，它对SV40 病毒的环状DNA分子上只有一个切点。 5’－G－A－A－T－T－C－3’ 3’－C－T－T－A－A－G－5’ 上述序列是旋转对称的。由于切点是错开的，因此使SV40 的环状分子切开成具有粘性末端（sticky ends）的线状分子。 上述序列中腺嘌呤的甲基化也能保护DNA免受EcoRI的切割。 m m
回文序列— palindrome G AAT TC CTTA AG ECOR切点的两条链中的序列从相反方向阅读是一样的,称为 回文序列 palindrome。从正向和反向阅读是同一句子 ABLE WAS I ERE I SAW ELBA
• 回文序列—palindrome ↓ 5’…… G A A T T C ……3’ 3’…… C T T A A G ……5’ ↑ EcoRI切点的两条链中的序列从相反方向阅读是一样的，称为 回文序列—palindrome。从正向和反向阅读是同一句子： ABLE WAS I ERE I SAW ELBA