流动相 流动相极性>固定相极性 底剂+有机调节剂（极性调节剂） 极性大的甲醇-水或乙腈-水 例：水+甲醇，乙腈，THF ⑧流动相极性与的关系 流动相极性↑，洗脱能力↓，↑，组分tR↑ ©出柱顺序：极性大的组分先出柱， 性小的组分后出柱 ⑥适用：非极性~中等极性组分 (HPLC80%问题)
流动相 流动相极性 > 固定相极性 底剂 + 有机调节剂（极性调节剂） 极性大的甲醇-水或乙腈-水 例：水 + 甲醇，乙腈，THF 流动相极性与k的关系： 流动相极性↑，洗脱能力↓，k↑，组分tR↑ 出柱顺序：极性大的组分先出柱， 性小的组分后出柱 适用：非极性~中等极性组分 （HPLC80%问题）
正反相色增法的比较 项目 反相 正相 固定相 非极性 强极性 流动相 中强极性 弱中极性 出峰顺序 强极性组分 弱极性组分 增加流动相极性 缩短 延长 保留时间的变化
正反相色谱法的比较 项目 反相 正相 固定相 非极性 强极性 流动相 中强极性 弱中极性 出峰顺序 强极性组分 弱极性组分 增加流动相极性 缩短 延长 保留时间的变化
第二节高效液相色谱法的固定相 和流动相及其选择 对固定相的要求： 颗粒细而均匀； 传质快； 化学键合相 耐高压； 化学稳定性好
第二节 高效液相色谱法的固定相 和流动相及其选择 对固定相的要求： ◼ 颗粒细而均匀； ◼ 传质快； ◼ 耐高压； ◼ 化学稳定性好。 化学键合相
化学键合相色谱法的固定相 (一)键合相的种类 1.非极性键合相：C8,C18 2.弱极性键合相：醚基，二羟基 3.极性键合相：-CN,-NH2 (二)健合相的性质和特点 1.健合反应 ◆在硅胶表面（具有三Si一O一H基）利用酯化反 应制得的=Si一OC键型化学键合固定相 =Si一OH+HO—R◆三SiO.R+H2O 利用硅烷化反应制得的≡Si一O一Si一C(硅 氧烷键型化学键合固定相
一、化学键合相色谱法的固定相 （一）键合相的种类 1. 非极性键合相：C8 ，C18 2. 弱极性键合相：醚基，二羟基 3. 极性键合相：-CN，-NH2 （二）键合相的性质和特点 1. 键合反应 ◆ 在硅胶表面（具有≡Si—O—H基）利用酯化反 应制得的≡Si—O—C键型化学键合固定相 ≡Si—OH + HO—R → ≡Si—O—R + H2O ◆ 利用硅烷化反应制得的≡Si—O—Si—C（硅 氧烷键型化学键合固定相
2.含碳量和覆盖度：含碳百分数，参加反应的硅醇 基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例。 3.键合相的特点。 优点 ①表面没液坑，传质速度比一般液体固定相快得多。 ②固定液不会流失，从而增加了色谱柱的稳定性和使用寿命。 ③由于可以键合不同官能团，因此易灵活地改变选择性。 ④有利于梯度洗提，也有利于配用灵敏的检测器和收集所需 的馏分。 注意：流动相中水相的pH在2~8。不同厂家生产的色谱柱性 能差别较大
2. 含碳量和覆盖度：含碳百分数，参加反应的硅醇 基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例。 3. 键合相的特点。 优点 ① 表面没液坑，传质速度比一般液体固定相快得多。 ② 固定液不会流失,从而增加了色谱柱的稳定性和使用寿命。 ③ 由于可以键合不同官能团，因此易灵活地改变选择性。 ④ 有利于梯度洗提，也有利于配用灵敏的检测器和收集所需 的馏分。 注意：流动相中水相的pH在2～8。不同厂家生产的色谱柱性 能差别较大