实验二植物细胞的结构一、目的与要求1.掌握光学显微镜下植物细胞的基本结构。二、材料与用品洋葱、辣椒果实、柿胚乳装片、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、培养血、刀片、剪刀、解部针、吸水纸、蒸馏水、I2一KI染液等三、内容与方法(一)植物细胞基本结构的观察1.表皮细胞结构的现察(1)洋葱表皮细胞装片的制作将洋葱鳞叶(或大葱鳞叶)纵向切一窄条(宽0.5cm),然后用刀片在鳞片叶内表皮处与窄条垂直的方向轻切两刀(划破表皮即可),两刀距离05cm左右。用镊子将两切缝间的一块表皮轻轻撕下来。装片时先在洁净的载玻片上放一滴清水,再放洋葱表皮,如果发生卷曲,应细心地用解部针将它展开,并盖上盖玻片。覆盖盖玻片时,用镊子夹起盖玻片,使其一边先接触到水,然后再轻轻放平,如果有气泡,可用镊子轻压盖玻片,将气泡赶出(或重新做一次)。如果水分过多,可用吸水纸吸除,至此临时水装片制成。图2-1洋葱鳞叶表皮细胞结构1.细胞壁2.细胞质3.细胞核4.液泡(2)洋葱表皮细胞结构的观察将制好的临时装片,置显微镜下,先用低倍镜观察洋葱表皮细胞的形态和排列情况:即可看到许多无色透明呈长方形的细胞(图1-2),排列整齐,紧密,在细胞中的细胞质内有一个圆形的细胞核。然后从盖玻片的一边加上一滴I2一KI染液,用吸水纸从盖玻片的另一侧将多余的染液吸除(另一种方法是把盖玻片取下,用吸水纸把材料周围的水分吸除,然后滴上一滴染料,经2一3分钟,加上盖玻片即可)。细胞染色后,在低倍镜下,选择一个比较清楚的区域,把它移至视野中央,再转换高倍镜仔细观察一个典型植物细胞的构造,识别下列各部分(图2-1):①细胞壁洋葱表皮每个细胞有明显界限,被I2一KI染液染成淡黄色,即为细胞壁。6
6 实验二 植物细胞的结构 一、目的与要求 1.掌握光学显微镜下植物细胞的基本结构。 二、材料与用品 洋葱、辣椒果实、柿胚乳装片、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、培养皿、刀 片、剪刀、解剖针、吸水纸、蒸馏水、I2-KI 染液等 三、内容与方法 (一)植物细胞基本结构的观察 1.表皮细胞结构的现察 (l)洋葱表皮细胞装片的制作 将洋葱鳞叶(或大葱鳞叶)纵向切一窄条(宽 0.5cm), 然后用刀片在鳞片叶内表皮处与窄条垂直的方向轻切两刀(划破表皮即可),两刀距离0. 5cm 左右。用镊子将两切缝间的一块表皮轻轻撕下来。装片时先在洁净的载玻片上放一滴 清水,再放洋葱表皮,如果发生卷曲,应细心地用解剖针将它展开,并盖上盖玻片。覆盖 盖玻片时,用镊子夹起盖玻片,使其一边先接触到水,然后再轻轻放平,如果有气泡,可 用镊子轻压盖玻片,将气泡赶出(或重新做一次)。如果水分过多,可用吸水纸吸除,至此 临时水装片制成。 (2)洋葱表皮细胞结构的观察 将制好的临时装片,置显微镜下,先用低倍镜观察洋 葱表皮细胞的形态和排列情况:即可看到许多无色透明呈长方形的细胞(图 1-2),排列整 齐,紧密,在细胞中的细胞质内有一个圆形的细胞核。然后从盖玻片的一边加上一滴 I2- KI 染液,用吸水纸从盖玻片的另一侧将多余的染液吸除(另一种方法是把盖玻片取下,用 吸水纸把材料周围的水分吸除,然后滴上一滴染料,经 2 一 3 分钟,加上盖玻片即可)。细 胞染色后,在低倍镜下,选择一个比较清楚的区域,把它移至视野中央,再转换高倍镜仔 细观察一个典型植物细胞的构造,识别下列各部分(图 2-1): ①细胞壁 洋葱表皮每个细胞有明显界限,被 I2-KI 染液染成淡黄色,即为细胞壁。 图 2-1 洋葱鳞叶表皮细胞结构 1.细胞壁 2.细胞质 3.细胞核 4.液泡
②细胞核在细胞质中可看到,有一个圆形或卵圆形的球状体,被I2一KI染液染成黄褐色,即为细胞核。细胞核内有染色较淡且明亮的小球体1一多个,即为核仁。幼嫩细胞,核居中央:成熟细胞,核偏于细胞的侧壁,多呈半球形或纺锤形。③细胞质细胞核以外,紧贴细胞壁内侧的无色透明的胶状物,即为细胞质,I2一KI染色后,呈淡黄色,但比壁还要浅一些。在较老的细胞中,细胞质是一薄层紧贴细胞壁在细胞质中还可以看到许多小颗粒,是线粒体、白色体等。4液泡为细胞内充满细胞液的腔穴,在成熟细胞单,可见1个或儿个透明的大液泡位于细胞中央。注意在细胞角隅处观察,把光线适当调暗,反复旋转细调节器,能区分出细胞质与液泡间的界面。2.果肉离散细胞的观察用解剖针挑取少许成熟的番茄或西瓜果肉,制成临时装片,置低倍镜下观察,可以看到圆形或卵圆形的离散细胞,与洋葱表皮细胞形状和排列形式皆不相同。然后在高倍镜下观察一个离散细胞,可清楚地看到细胞壁、细胞核、细胞质和液泡,其基本结构与洋葱表皮细胞相同。(二)胞间连丝和纹孔的观察用刀片沿新鲜的红辣椒的果皮表面平行方向,切取一薄片(或把辣椒的果皮里面朝上平放桌面上,用快刀刮去肥厚物质,使之很薄,加碘液染色制片观察。在高倍镜下,可以看见其表皮是由不太规则的细胞群构成的,细胞中有着淡黄色的细胞质。细胞壁很厚,着深黄色,壁上有小孔(纹孔),孔里有细胞质丝穿过(见图2-2)。取柿胚乳细胞永久制片,置低倍镜下观察,可见到许多多角形细胞,细胞壁特别厚,细胞腔很小,其内原生质体被染成紫黑色或在制片过程中脱落。选择相邻两个细胞的细胞壁部分,移至视野中央,转换高倍镜,调暗光线,可见相邻的两个细胞加厚的细胞壁上,有许多暗黑色的细胞质形成的细丝,即胞间连丝。柿胚乳一细胞壁1内含物胞连丝一胞间层图2-3柿胚乳细胞(示胞间连丝)图2-2辣椒果实表皮细胞(示纹孔)四、作业要求1.绘出2一3个相邻洋葱表皮细胞详图,并注明各部分结构名称。7
7 ②细胞核 在细胞质中可看到,有一个圆形或卵圆形的球状体,被 I2-KI 染液染成黄 褐色,即为细胞核。细胞核内有染色较淡且明亮的小球体 1 一多个,即为核仁。幼嫩细胞, 核居中央;成熟细胞,核偏于细胞的侧壁,多呈半球形或纺锤形。 ③细胞质 细胞核以外,紧贴细胞壁内侧的无色透明的胶状物,即为细胞质,I2-KI 染色后,呈淡黄色,但比壁还要浅一些。在较老的细胞中,细胞质是一薄层紧贴细胞壁, 在细胞质中还可以看到许多小颗粒,是线粒体、白色体等。 ④液泡 为细胞内充满细胞液的腔穴,在成熟细胞里,可见 1 个或几个透明的大液泡, 位于细胞中央。注意在细胞角隅处观察,把光线适当调暗,反复旋转细调节器,能区分出 细胞质与液泡间的界面。 2.果肉离散细胞的观察 用解剖针挑取少许成熟的番茄或西瓜果肉,制成临时装片, 置低倍镜下观察,可以看到圆形或卵圆形的离散细胞,与洋葱表皮细胞形状和排列形式皆 不相同。然后在高倍镜下观察一个离散细胞,可清楚地看到细胞壁、细胞核、细胞质和液 泡,其基本结构与洋葱表皮细胞相同。 (二)胞间连丝和纹孔的观察 用刀片沿新鲜的红辣椒的果皮表面平行方向,切取一薄片(或把辣椒的果皮里面朝上 平放桌面上,用快刀刮去肥厚物质,使之很薄),加碘液染色制片观察。在高倍镜下,可以 看见其表皮是由不太规则的细胞群构成的,细胞中有着淡黄色的细胞质。细胞壁很厚,着 深黄色,壁上有小孔(纹孔),孔里有细胞质丝穿过(见图 2-2)。 取柿胚乳细胞永久制片,置低倍镜下观察,可见到许多多角形细胞,细胞壁特别厚, 细胞腔很小,其内原生质体被染成紫黑色或在制片过程中脱落。选择相邻两个细胞的细胞 壁部分,移至视野中央,转换高倍镜,调暗光线,可见相邻的两个细胞加厚的细胞壁上, 有许多暗黑色的细胞质形成的细丝,即胞间连丝。 四、作业要求 1.绘出 2-3 个相邻洋葱表皮细胞详图,并注明各部分结构名称。 图 2-2 辣椒果实表皮细胞(示纹孔) 图 2-3 柿胚乳细胞(示胞间连丝)
实验三植物细胞的质体与内含物一、目的与要求1.掌握植物细胞内质体的类型、形态结构和存在部位。2.观察认识在光学显微镜下植物内含物的形态结构和存在部位。二、材料与用品1,用品:显微镜,解部镜,刀片,载玻片,盖玻片,镊子,吸水纸,培养血,吸管,酒精灯,清洁纱布或绸布,毛笔刷。甲基蓝溶液,0.25%的碱性紫,酒精,间苯三酚溶液(50%的酒精),苏丹IⅢI酒精试剂,I,一KI染液,1.5%的氢氟酸,蒸馏水等。2.材料:洋葱,红辣椒,马铃薯块茎,鸭跖草,秋海棠或天竺葵叶的叶柄,葫芦藓叶,菠菜叶,山楂,番茄,胡萝下,麦粒,菌麻种子,扁豆花(牵牛花或其他红色、粉色、紫色的花瓣),带红色的苹果,紫茄子,柿子种子。三、内容与方法(一)线粒体的观察撕取鸭跖草叶或大葱叶的内表皮一小块,置于载玻片上,加一滴0.25%碱性紫,1一2分钟后冲洗除去染色剂,加水制片在高倍显微镜下观察,可见到一些微小的颗粒被染成紫色,题粒就是线粒体(图3-1)RtE科47紫鸭跖草表皮细胞图3-1鸭跖草表皮细胞(示线粒体)图3-2葫芦鲜叶细胞图3-3(示白色体)(示叶绿体)(二)质体的观察1.叶绿体用镊子撕取新鲜黑藻叶片或藓类叶片,制成临时装片,置显微镜下观察。可见黑藻叶片的薄壁细胞中都有大量椭圆形的绿色颗粒状结构,即为叶绿体(图3-2)。取其它绿色植物的叶片,,用镊子撕去背面表皮,夹取少量叶肉细胞,制成临时装片,显微镜观察,也可看到不同形状的叶绿体。2.有色体用镊子撕取一小块红辣椒或红番茄果皮,用刀片轻轻地刮去果肉,制成临时装片,置显微镜下观察,可清楚地看到细胞的细胞质中有许多红色的小颗粒,即为有色体(图3-4)。或用针从果皮下挑取一小块果肉制成临时装片,用高倍镜观察,可以看到在8
8 实验三 植物细胞的质体与内含物 一、目的与要求 1.掌握植物细胞内质体的类型、形态结构和存在部位。 2.观察认识在光学显微镜下植物内含物的形态结构和存在部位。 二、材料与用品 1.用品:显微镜,解剖镜,刀片,载玻片,盖玻片,镊子,吸水纸,培养皿,吸管, 酒精灯,清洁纱布或绸布,毛笔刷。甲基蓝溶液,0.25%的碱性紫,酒精,间苯三酚溶液 (50%的酒精),苏丹Ⅲ酒精试剂,I2-KI 染液,1.5%的氢氟酸,蒸馏水等。 2.材料:洋葱,红辣椒,马铃薯块茎,鸭跖草,秋海棠或天竺葵叶的叶柄,葫芦藓叶, 菠菜叶,山楂,番茄,胡萝卜,麦粒,蓖麻种子,扁豆花(牵牛花或其他红色、粉色、紫色 的花瓣),带红色的苹果,紫茄子,柿子种子。 三、内容与方法 (一)线粒体的观察 撕取鸭跖草叶或大葱叶的内表皮一小块,置于载玻片上,加一滴 0.25%碱性紫,1-2 分钟后冲洗除去染色剂,加水制片在高倍显微镜下观察,可见到一些微小的颗粒被染成紫 色,这些颗粒具有布朗运动,这些颗粒就是线粒体(图 3-1) (二)质体的观察 1.叶绿体 用镊子撕取新鲜黑藻叶片或藓类叶片,制成临时装片,置显微镜下观察。 可见黑藻叶片的薄壁细胞中都有大量椭圆形的绿色颗粒状结构,即为叶绿体(图 3-2)。取 其它绿色植物的叶片,用镊子撕去背面表皮,夹取少量叶肉细胞,制成临时装片,显微镜 观察,也可看到不同形状的叶绿体。 2.有色体 用镊子撕取一小块红辣椒或红番茄果皮,用刀片轻轻地刮去果肉,制成临 时装片,置显微镜下观察,可清楚地看到细胞的细胞质中有许多红色的小颗粒,即为有色 体(图 3-4)。或用针从果皮下挑取一小块果肉制成临时装片,用高倍镜观察,可以看到在 图 3 -1 3-2 3 -3
它们的果肉薄壁细胞的细胞质中具有橙红色的有色体3.白色体用镊子撕取洋葱鳞叶(鸭跖草叶下表皮或大葱表皮),制成临时装片,置显微镜下观察,在表皮细胞的细胞核周围可以看到许多微小、透明的白色小颗粒,即为白色体。在白菜或油菜的幼叶、叶柄的表皮细胞中,也可看到白色体(见图3-3)。2.5413图3-5马铃薯细胞中的淀粉粒图3-4有色体1.山植果肉细胞:2.红辣椒果肉细胞:1.简单淀粉粒:2.和3.半复粒:4.复粒3.番茄果肉细胞:4.有萝卜根皮层细胞(三)细胞中几种后含物的观察1.淀粉粒用涂片法在切开的马铃薯块茎的断面上轻轻刮一下,将附着在刀口附近的浆液涂在载玻片上,用稀释的1I2一KI染色后,制成临时装片,置低倍镜下,寻找淀粉粒分布稀少的部位,并将其移至中央,再换高倍镜仔细观察,可见椭圆形、卵形或圆形,大小不等的蓝紫色淀粉粒。调节光圈,减弱光强度,可见淀粉粒有一个中心,偏在淀粉粒的一端,这个中心即为脐点,围绕脐点有许多明暗相间的轮纹,即为马铃薯单位淀粉粒。在视野中除了有单粒淀粉粒外,还可见到复粒淀粉粒和半复位淀粉粒,注意如何区别它们?(见图3-5)。2.贮藏蛋白质取花生或麻种子,剥去种皮,用肥厚的子叶或胚乳做徒手切片。先把切片放入盛有纯酒精的培养血中洗涤数分钟,使切片中的脂肪溶解在酒精中。然后将切片取出制成装片在高倍镜下观察,可以看到胚乳细胞内的糊粉粒,它是由贮藏在液泡中的蛋白晶体、球蛋白体和充填的无定形的胶质共同组成的(见图3-6)。如在切片上加一滴碘碘化钾试剂,其蛋白质呈黄色。3.油滴取花生子叶或葩麻胚乳做徒手切片,并用苏丹IⅡI溶液染色,在低倍镜下观察,可看见在细胞内有被染成红色的油滴(脂肪滴)。9
9 它们的果肉薄壁细胞的细胞质中具有橙红色的有色体 3.白色体 用镊子撕取洋葱鳞叶(鸭跖草叶下表皮或大葱表皮),制成临时装片,置显 微镜下观察,在表皮细胞的细胞核周围可以看到许多微小、透明的白色小颗粒,即为白色 体。在白菜或油菜的幼叶、叶柄的表皮细胞中,也可看到白色体(见图 3-3)。 (三)细胞中几种后含物的观察 1.淀粉粒 用涂片法在切开的马铃薯块茎的断面上轻轻刮一下,将附着在刀口附近的 浆液涂在载玻片上,用稀释的 I2-KI 染色后,制成临时装片,置低倍镜下,寻找淀粉粒分 布稀少的部位,并将其移至中央,再换高倍镜仔细观察,可见椭圆形、卵形或圆形,大小 不等的蓝紫色淀粉粒。调节光圈,减弱光强度,可见淀粉粒有一个中心,偏在淀粉粒的一 端,这个中心即为脐点,围绕脐点有许多明暗相间的轮纹,即为马铃薯单位淀粉粒。在视 野中除了有单粒淀粉粒外,还可见到复粒淀粉粒和半复位淀粉粒,注意如何区别它们?(见 图 3-5)。 2.贮藏蛋白质 取花生或蓖麻种子,剥去种皮,用肥厚的子叶或胚乳做徒手切片。先把切片放入盛有 纯酒精的培养皿中洗涤数分钟,使切片中的脂肪溶解在酒精中。然后将切片取出制成装片, 在高倍镜下观察,可以看到胚乳细胞内的糊粉粒,它是由贮藏在液泡中的蛋白晶体、球蛋 白体和充填的无定形的胶质共同组成的(见图 3-6)。如在切片上加一滴碘-碘化钾试剂,其 蛋白质呈黄色。 3.油滴 取花生子叶或蓖麻胚乳做徒手切片,并用苏丹 III 溶液染色,在低倍镜下观察,可看见 在细胞内有被染成红色的油滴(脂肪滴)。 3 -4 3 -5
4.结晶体的观察()针晶剥取洋葱头最外面的薄而干燥的鳞片叶(或鸭跖草叶片的表皮),剪成几小块放入30%的甘油水溶液中,浸泡一会,然后用镊子选一薄片制成临时装片,置显微镜下观察,可以看到有些表皮细胞内有针形的结晶,即为针晶。(2)簇晶(示范)取秋海棠叶柄(或天竺葵茎)做横切徒手切片,在显微镜下观察,可见其基本组织细胞中常有单晶体或晶簇(见图3-7)。图3-7各种晶体图3-6麻的胚乳细胞(示糊粉粒)1.针晶体:2.菱形晶体:3.晶簇1.油脂:2.细胞质:3.糊粉粒:4.蛋白晶体:5.蛋白球体5.花青素将扁豆花瓣平铺在载玻片上,用刀片刮去下表皮和部分薄壁组织,将剩下的部分装片,在显微镜下观察,可见其薄壁细胞内的细胞液呈红色,这就是细胞液中的花青素显现的颜色。四、作业与综合题1.选取适当的植物材料,利用徒手切片技术,分别制临时装片,用显微镜观察植物细胞的质体及细胞中常见的后含物,并分别绘出简图,标出名称。10
10 4.结晶体的观察 (l)针晶 剥取洋葱头最外面的薄而干燥的鳞片叶(或鸭跖草叶片的表皮),剪成几 小块放入 30%的甘油水溶液中,浸泡一会,然后用镊子选一薄片制成临时装片,置显微镜 下观察,可以看到有些表皮细胞内有针形的结晶,即为针晶。 (2)簇晶(示范)取秋海棠叶柄(或天竺葵茎)做横切徒手切片,在显微镜下观察, 可见其基本组织细胞中常有单晶体或晶簇(见图 3-7)。 5.花青素 将扁豆花瓣平铺在载玻片上,用刀片刮去下表皮和部分薄壁组织,将剩下的部分装片, 在显微镜下观察,可见其薄壁细胞内的细胞液呈红色,这就是细胞液中的花青素显现的颜 色。 四、 作业与综合题 1.选取适当的植物材料,利用徒手切片技术,分别制临时装片,用显微镜观察植物细 胞的质体及细胞中常见的后含物,并分别绘出简图,标出名称。 3 -6 3 -7