(二) 细胞凋亡的检测方法 4.彗星电泳法 正常细胞的核无DNA断裂,泳动时保持圆球形 凋亡细胞中的DNA降解片段在电场中泳动速度较快,细胞核呈现出慧星式图案
(二)细胞凋亡的检测方法 4. 彗星电泳法 正常细胞的核无DNA 断裂,泳动时保持圆球形 凋亡细胞中的DNA 降解片段在电场中泳动速度较快,细胞核呈现出慧星式图案
(二) 细胞凋亡的检测方法 5.流式细胞分析 50100 150 50100150 DNA content DNA content Control Dexamet hason-treated 左图:正常细胞周期右图:地塞米松 处理的细胞在G峰左侧可见一典型的凋亡峰型(亚二倍体峰)
(二)细胞凋亡的检测方法 5. 流式细胞分析 左图:正常细胞周期 右图:地塞米松 处理的细胞在G1峰左侧可见一典型的凋亡峰型(亚二倍体峰)
(二) 细胞凋亡的检测方法 6.检测细胞膜成分变化 Normal cell Outside Cytosol of cell -检测磷脂酰丝氨酸(PS) 的外翻 Phosphatidylserine Apoptosis ecepto -检测caspases的激活 -检测Cytc的释放 一检测线粒体膜电位的变化等 eat me"signal is the presence of phosphatidylserine molecules in the outer leaflet of PM of apoptotic cells
(二)细胞凋亡的检测方法 6. 检测细胞膜成分变化 – 检测磷脂酰丝氨酸(PS) 的外翻 – 检测caspases 的激活 – 检测Cyt c 的释放 – 检测线粒体膜电位的变化等 “eat me” signal is the presence of phosphatidylserine molecules in the outer leaflet of PM of apoptotic cells
(二)细胞凋亡的检测方法 1)P从细胞膜内侧转移到外侧,在细胞受到凋亡诱导后不久 发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依 赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS, 再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡 早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都适用),可与 DNA染料或别的晚期检测方法相结合来标记凋亡的发展阶段
1)PS从细胞膜内侧转移到外侧,在细胞受到凋亡诱导后不久 发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依 赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS, 再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡 早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都适用),可与 DNA染料或别的晚期检测方法相结合来标记凋亡的发展阶段 。 (二)细胞凋亡的检测方法
(二)细胞凋亡的检测方法 细胞凋亡早期,位于细胞 膜内侧的磷脂酰丝氨酸 DDC (PS)迅速翻转到细胞膜 外侧,可以用PS与抗凝血 剂Annexin V的相互作用 检测外翻的PS。 Annexin V
细胞凋亡早期,位于细胞 膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS)迅速翻转到细胞膜 外侧,可以用PS 与抗凝血 剂Annexin V 的相互作用 检测外翻的PS。 (二)细胞凋亡的检测方法