5'NNNNNNGTTAACNNNNN33'NNNNNNCAATTGNNNNN55'NNNNNGTTPAACNNNNN33'NNNNNCAApTTGNNNNN5HaeI的识别序列和酶切切口（平端）
5’NNNNNNGTTAACNNNNN3‘ 3’NNNNNNCAATTGNNNNN5‘ 5’NNNNNGTT pAACNNNNN3’ 3‘NNNNNCAAp TTGNNNNN5’ HaeⅠ的识别序列和酶切切口（平端）
三、实验仪器和试剂仪器：恒温水浴锅★电泳相关仪器：微波炉、水平式凝胶电泳槽★电泳仪、紫外投射仪微量加样器和吸头Eppendorf管★
三、实验仪器和试剂 仪器： ★ 恒温水浴锅 ★ 电泳相关仪器：微波炉、水平式凝胶电泳槽、 电泳仪、紫外投射仪 ★ 微量加样器和吸头 ★ Eppendorf管
试剂：★酶切相关试剂：>纯化质粒pTA2-p53质粒（200ng/μI）>限制性内切酶：EcoRI（8-20U/μ1）>10×酶切缓冲液电泳相关试剂★>琼脂糖>1XTBE缓冲液>DNA分子量标准>GoldView（25X贮存液）>6×上样缓冲液
试剂： ★ 酶切相关试剂： ➢纯化质粒pTA2-p53质粒（200ng/μl） ➢限制性内切酶：EcoR Ⅰ（8-20U/ μl ） ➢10×酶切缓冲液 ★ 电泳相关试剂 ➢琼脂糖 ➢1 ×TBE缓冲液 ➢DNA分子量标准 ➢GoldView（25×贮存液 ） ➢6 ×上样缓冲液
oriBlacAmpKpnlEcoRIpTA2-p53p53gene:1179bpp53geneEcORI3956bpSacllacpromoterpUCoriApalHine llDra llBsp1061AccIT7PromoterBssHIIClaIHindlllEcoRVKpnIEcoO109IXhoISallM13-20primerbindingsiteKS primerbinding siteT7 primer binding site5'TTGTAAAAOGACGGOCAGTGAGOGOGOGTAATAOGACTCACTATAGGGOGAATTGGGTACCGGGOOOOOOCTOGAGGTOGAOGGTATCGATAAGCTTGATAT3'AACATTTTGCTGOOGGTCACTCGOGOGCATTATGCTGAGTGATATOOOGCTTAACOCATGGOOOGGGGGGGAGCTOCAGCTGOCATAGCTATTCGAACTATAEcoRI PstEcORISmaIBamHlSpeIXbaTNotIBstXISaelSacIEaglCGAATTCOOATACT3TATTGGGAATTOOGCAGOOGGGGGATOCACTAGITCTAGAGOGOOOGOCAOGOGGTGGAGCTO(al oned insert)3TCTATGCCTTAAGGGATAACOCTTAAGGCGTOGGGOOOCCTAGGTGATCAAGATCTCGOOGGOGGTGGOGOCACCTOGAGGSK primerbinding site
p53 gene: 1179bp
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