分子生物学实验技术DNA限制性内切酶酶切与琼脂糖凝胶电泳
DNA限制性内切酶酶切 与琼脂糖凝胶电泳 分子生物学实验技术
一、实验目的了解限制性内切酶的概念及其应用。掌握DNA酶切的基本原理和实验方法掌握酶切产物的琼脂糖凝胶电泳检测方法
一、实验目的 ➢ 了解限制性内切酶的概念及其应用。 ➢ 掌握DNA酶切的基本原理和实验方法。 ➢ 掌握酶切产物的琼脂糖凝胶电泳检测方 法
二、实验原理限制性内切酶概念1、>是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。>是基因工程的重要工具。>这些酶都是从原核生物中发现。它们的功能犹似高等功物的免疫系统，用于抗击外来DNA的侵袭
二、实验原理 ➢是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA 水解酶。 ➢是基因工程的重要工具。 ➢这些酶都是从原核生物中发现，它们的功能犹似 高等功物的免疫系统， 用于抗击外来DNA的侵袭。 1、限制性内切酶概念
2、举例：EcoRI的识别序列5'- GAATTC-33'- CTTAAG-5HaeI的识别序列5'- GTTAAC-33'-CAATTG-5
5’- GAATTC-3’ 3’- CTTAAG -5’ 5’- GTTAAC-3’ 3’- CAATTG -5’ EcoRⅠ的识别序列 HaeⅠ的识别序列 2、举例：
5'NNNNNNNGAATTCNNNNNNNN33'NNNNNNNCTTAAGNNNNNNNN55'NNNNNGPAATTCNNNNNN33'NNNNNCTTAAPGNNNNNN5EcoRI的识别序列和酶切切口（粘端）
5’NNNNNNNGAATTCNNNNNNNN3’ 3’NNNNNNNCTTAAGNNNNNNNN5’ 5’NNNNNG 3’NNNNNCTTAAp EcoRⅠ的识别序列和酶切切口（粘端） pAATTCNNNNNN3' GNNNNNN5’