川六华西医院 、荧光显微镜落射光、透射光 ocular light reflector collecting lens light souree exciter 光源 collecting lenses 高压汞灯 reflected heat-absorbing uorescent 氙灯 barrier filter 卤素灯 dichroic mirror 吸收滤光片 bjective 隔热滤光片 410~650nm oG(橙黄色) sUi GG(淡绿黄色) 激发滤光片 紫外光滤片(UG) 275~400nm(365nm) 蓝紫外光滤片(BG) 325~500nm(410nm)
光源： 高压汞灯 氙灯 卤素灯 隔热滤光片 激发滤光片 吸收滤光片 二、荧光显微镜 紫外光滤片（UG） 275~400 nm（365 nm） 蓝紫外光滤片（BG） 325~500 nm（410 nm） 410~650 nm OG（橙黄色） GG（淡绿黄色） 落射光、透射光
川六华西医院 荧光显微镜检查 选择合适光源和滤光片 FTC可选用激发滤光片BG12与吸收滤光片oG4(橙 黄色)或GG9(淡绿黄色)。 ·RB200可选用BG12与0G5配合
荧光显微镜检查 选择合适光源和滤光片 • FITC可选用激发滤光片BG12与吸收滤光片OG4（橙 黄色）或GG9（淡绿黄色）。 • RB200可选用BG12与OG5配合
川六华西医院 、荧光素-抗体结合物 荧光抗体:荧光素与特异性抗体通过化学共价键的方式 结合而成。 制备过程包括三个步骤:标记、纯化、鉴定
• 荧光抗体：荧光素与特异性抗体通过化学共价键的方式 结合而成。 • 制备过程包括三个步骤：标记、纯化、鉴定 三、荧光素-抗体结合物
川六华西医院 (一)标记(抗体与荧光素的结合) 1.抗体的要求: (1)用于标记的抗体,具有高特异性和高亲和力(常采用 单克隆抗体); (2)多克隆抗体则不应含有针对正常组织成分的抗体; (3)常用lgG型和lgM型抗体作标记
（一）标记（抗体与荧光素的结合） 1. 抗体的要求： （1）用于标记的抗体，具有高特异性和高亲和力（常采用 单克隆抗体）； （2）多克隆抗体则不应含有针对正常组织成分的抗体； （3）常用IgG型和IgM型抗体作标记
川六华西医院 2.荧光素应符合以下要求 (1)具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合 后不易解离,未结合的色素及其降解产物易于清除; (2)荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持高的荧光效率; (3)荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明; (4)与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质; (5)标记方法简单、安全无毒; (6)与蛋白质形成的结合物稳定,易于保存
2. 荧光素应符合以下要求 （1）具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团，与蛋白质结合 后不易解离，未结合的色素及其降解产物易于清除； （2）荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持高的荧光效率； （3） 荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明； （4）与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质； （5） 标记方法简单、安全无毒； （6）与蛋白质形成的结合物稳定，易于保存