10× Buffer 25mmol/L Mg2+ 3ul Taq酶 0.5ul(2u) 上游引物 ddO 20.5u /50 按PCR循环参数进行 RT-PCR 第十一章 2021/2/23
第十一章 2021/2/23 11 10× Buffer 5 l 25mmol/L Mg2+ 3l Taq酶 0.5 l(2.5u) 上游引物 1l ddH2O 20.5l /50 l 按PCR循环参数进行 RT--PCR
(三)PCR产物的积累规律 DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。 反应初期,目的DNA片段呈指数形式 (2n),随着目的DNA的积累,在引物 模板与DNA聚合酶达到一定比例时,酶的 催化反应趋于饱和—平台期。(25个循环) (四)PCR反应的自动化 第十一章 2021/2/23
第十一章 2021/2/23 12 (三)PCR产物的积累规律 – DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。 – 反应初期,目的DNA片段呈指数形式 (2 n),随着目的DNA的积累,在引物— 模板与DNA聚合酶达到一定比例时,酶的 催化反应趋于饱和—平台期 。(25个循环) (四)PCR反应的自动化