接着说,他们把方方面面都搞清楚了,但这仅仅是一个机理研究吗?错!他 们有非常明确地目的——剑锋直指!可以人为定制的特异性内切酶!为我所用, 指哪打哪。 他们紧接着就利用这些发现,设计,做了体外切割GFP基因的实验,果然获 得成功。并且都是按照预想的设计的切口切开,这难道不是“想切哪里切哪里, 妈妈再也不用担心我的课题”?。 同时,推断由于限制性的PAM的序列NGG很常见,基本上利用的限制很少 有望可以实现见人杀人,见鬼杀鬼!并且2个必须的RNA已经可以“双剑 合璧”,这样可以使构建的RNA更方便也更稳定。一个新型“大杀器“呼之欲 出 Cas9 programmed by crRNA: tracrRNA duplex PAM rget DNA CTRNA 3- tracrRNA Cas9 programmed by single chimeric RNA linker loop crRNA-tracrRNA chimera
接着说，他们把方方面面都搞清楚了，但这仅仅是一个机理研究吗？错！他 们有非常明确地目的——剑锋直指！可以人为定制的特异性内切酶！为我所用， 指哪打哪。 他们紧接着就利用这些发现，设计，做了体外切割 GFP 基因的实验，果然获 得成功。并且都是按照预想的设计的切口切开，这难道不是“想切哪里切哪里， 妈妈再也不用担心我的课题”？。 同时，推断由于限制性的 PAM 的序列 NGG 很常见，基本上利用的限制很少 ——有望可以实现见人杀人，见鬼杀鬼！并且 2 个必须的 RNA 已经可以“双剑 合璧”，这样可以使构建的 RNA 更方便也更稳定。一个新型“大杀器“呼之欲 出
图10cRNA和 tra rrna的“双剑合璧”【2】 (对了,这里要特别提到的是【13】,和【2】内容非常相似,同年9月4号 的PNAS,如果没什么意外,应该是晚了一步。看来做科研,不但找准方向,下 手稳准狠,动作还要快啊!) 好了,现在已经是“司马昭之心,路人皆知”了,再笨我们也猜到他们的目 的了——构建一个可以按需定制的DNA定点剪切工具。然而又一次我们要说, 技术和发现放在那,决定高度的是你能看多远。(也有可能他们想到了但还没做 到) 万事俱备,只欠东风”。基础已打好,序幕已拉开,热场已完成,真正的 好戏就要开演了。 三、“洲”际导弹,秒杀众生 -多种真核、原核细胞中的基因编辑、合成生物学利器 刚才的序幕估计只是让关注该领域的人激动兴奋了一下(而且好多人也正 是从关注这篇文章开始进入领域,开始抢滩),然而真正让 CRISPR系统走进所 有人的视野,发出不容忽视的声音,引发了震动的是接下来的两篇文章。虽然我 们这个故事从头讲下来你觉得仿佛有此文章顺理成章,但是乍一看,两篇文章的 成果实在太诱人,太漂亮了。也的确,短短5个月,向前迈进了一大步,重要的 一大步。 虽然说是2篇文章,意义却是一个,他俩很有意思,背靠背,连着印在同 期的 Science上,一前一后。第1篇【1】就是丛乐学长的文章了,而第2篇 【17来头也不小,是 George M. Church课题组的作品。 (应该说,可以看出第二篇文章几乎是被第-篇的文章“逼”出来的,有种
图 10 crRNA 和 tra crRNA 的“双剑合璧”【2】 （对了，这里要特别提到的是【13】，和【2】内容非常相似，同年 9 月 4 号 的 PNAS，如果没什么意外，应该是晚了一步。看来做科研，不但找准方向，下 手稳准狠，动作还要快啊！） 好了，现在已经是“司马昭之心，路人皆知”了，再笨我们也猜到他们的目 的了——构建一个可以按需定制的 DNA 定点剪切工具。然而又一次，我们要说， 技术和发现放在那，决定高度的是你能看多远。（也有可能他们想到了但还没做 到） “万事俱备，只欠东风”。基础已打好，序幕已拉开，热场已完成，真正的 好戏就要开演了。 三、 “洲”际导弹，秒杀众生 ——多种真核、原核细胞中的基因编辑、合成生物学利器 刚才的序幕估计只是让关注该领域的人激动兴奋了一下（而且好多人也正 是从关注这篇文章开始进入领域，开始抢滩），然而真正让 CRISPR 系统走进所 有人的视野，发出不容忽视的声音，引发了震动的是接下来的两篇文章。虽然我 们这个故事从头讲下来你觉得仿佛有此文章顺理成章，但是乍一看，两篇文章的 成果实在太诱人，太漂亮了。也的确，短短 5 个月，向前迈进了一大步，重要的 一大步。 虽然说是 2 篇文章，意义却是一个，他俩很有意思，背靠背，连着印在同 期的 Science 上，一前一后。第 1 篇【1】就是丛乐学长的文章了，而第 2 篇 【17】来头也不小，是 George M. Church 课题组的作品。 （应该说，可以看出第二篇文章几乎是被第一篇的文章“逼”出来的，有种