RNApol.(反应体系中 无NTP) DNase I消化DNA 分离 DNA序列分析 核心启动子 -10区(Pribnow框):TATAAT -35区:TTGACA
-10区(Pribnow框):TATAAT -35区:TTGACA 核心启动子
启动子Promoter +1 一致序列仅代表一种概率,是 综合统计多种基因启动子序列 35 10 的结果。 TTaG7AsCs4Aas TAsTAAoT ●一个基因的启动子序列与一致序列越接近,活性就越高,为强启 动子。完全匹配序列出现在极强启动子中。 破坏与一致序列匹配程度的突变会使启动子活性减弱,称为下降 突变。 ·使启动子序列更接近一致序列的突变能增强启动子活性,称为上 升突变
⚫ 一致序列仅代表一种概率,是 综合统计多种基因启动子序列 的结果。 ⚫ 一个基因的启动子序列与一致序列越接近,活性就越高,为强启 动子。完全匹配序列出现在极强启动子中。 ⚫ 使启动子序列更接近一致序列的突变能增强启动子活性,称为上 升突变。 ⚫ 破坏与一致序列匹配程度的突变会使启动子活性减弱,称为下降 突变
-35序列与-10序列的最佳间距 Consensus sequences for RNA polymerase binding. Transcription start site -35 -10 TTGACA spacer TATAAT 59 bases -35 region Pribnow box Coding sequences RNA polymerase 间距一般为16~19bp, 50 其中距离为17bp时转 录效率最高,大于20 或小于15会降低启动 活性。 151617 18 19 spacing between-35 and-10 scquences
-35序列与-10序列的最佳间距 间距一般为16~19bp, 其中距离为17bp时转 录效率最高,大于20 或小于15会降低启动 活性。 spacer
核心启动子功能 ●-10区:RNA聚合酶全酶的紧密结合位点,有助于 DNA局部双链的解开。 ●-35序列:RNA聚合酶全酶的松弛结合位点,RNA 聚合酶全酶的识别位点,对全酶有很高的亲和性
⚫ -10区:RNA聚合酶全酶的紧密结合位点,有助于 DNA局部双链的解开。 ⚫ -35序列:RNA聚合酶全酶的松弛结合位点,RNA 聚合酶全酶的识别位点,对全酶有很高的亲和性。 核心启动子功能
上游元件(UP element) ●有些转录活性很强的基因的启动子中,-35区上游 有一段富含AT的序列。 ●UP元件可以被RNA聚合酶特异性识别。 ●UP元件可以显著提高转录效率,约30倍。 ●RNA聚合酶的亚基负责识别结合UP元件。 CTD UP -35 -10
上游元件(UP element) ⚫ 有些转录活性很强的基因的启动子中,-35区上游 有一段富含AT的序列。 ⚫ UP元件可以被RNA聚合酶特异性识别。 ⚫ UP元件可以显著提高转录效率,约30倍。 ⚫ RNA聚合酶的α亚基负责识别结合UP元件