实验室常用两种乳糖类似物一异丙基 巯基半乳糖苷(IPTG)和巯甲基半乳 糖苷(TMG),在酶活性分析中常用发 色底物O-硝基半乳糖苷(ONPG)。因 为它们都不是半乳糖苷酶的底物,所以 又称为安慰性诱导物( gratuitous inducer)。 nlpe& Pge
实验室常用两种乳糖类似物 —异丙基 巯基半乳糖苷(IPTG)和巯甲基半乳 糖苷(TMG),在酶活性分析中常用发 色底物O-硝基半乳糖苷(ONPG)。因 为它们都不是半乳糖苷酶的底物,所以 又称为安慰性诱导物( gratuitous inducer)
HOCHz CH, HOCH2 S-C-H HO CH,OH CH3 HO/O OH H OH OH H OH H OH OH 异丙基巯基半乳糖苷(IPTG) 巯甲基半乳糖苷(TMG) O硝基半乳糖苷(ONPG) 图683种乳糖类似物 nlpe& Pge
用35sS标记大肠杆菌细胞(培养基中 没有半乳糖),将这些带有放射性的细 菌转移到不含3S的培养基中,加入诱导 物后β-半乳糖苷酶便开始合成。分离 纯化β-半乳糖苷酶,发现这种酶无3S 标记,说明这种酶是加入诱导物后新合 成的 nlpe& Pge
用35 S标记大肠杆菌细胞(培养基中 没有半乳糖),将这些带有放射性的细 菌转移到不含35 S的培养基中,加入诱导 物后β -半乳糖苷酶便开始合成。分离 纯化β -半乳糖苷酶,发现这种酶无35 S 标记,说明这种酶是加入诱导物后新合 成的
6.2.2操纵子模型及其影响因子 Jacob和 Monod认为诱导酶(他们当 时称为适应酶)现象是个基因调控问 题,而且可以用实验方法进行研究,他 们通过大量实验及分析,建立了现在已 经被人们广泛接受的乳糖操纵子的控制 模型。 nlpe& Pge
6. 2. 2 操纵子模型及其影响因子 Jacob和Monod认为诱导酶(他们当 时称为适应酶)现象是个基因调控问 题,而且可以用实验方法进行研究,他 们通过大量实验及分析,建立了现在已 经被人们广泛接受的乳糖操纵子的控制 模型
无诱导物,结构基因不表达 lacI基因转录产 生阻遏物单体,结 阳遇物四聚体 合形成同源四体 图6-9Lac操 lacI同源四体与 0区DANA相结合 纵子的调控 阻遏基因转录 模式。 oe启动子区/操纵子区 acY 诱导物启动1ac结构基因转录 导物使1ac变 成不能与0区相结 合的非活性形式 无活性的阻遏物 RNA聚合酶与lac 启动子区相结合 起始基因转录 QQ0000000900QQmA 被转录成 3个蛋白质 B·半乳糖苷酶 透过酶 β·半乳糖苷乙酰基转移酶 nlpe& Pge
图6-9 Lac 操 纵子的调控 模式