实验原理 ◇将患者血清在琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后,将固定剂 和各型lg及其轻链抗血清加于凝胶表面的各自泳道上,经孵 育让固定剂和抗血清在各自泳道对应的凝胶內渗透并扩散 若有对应抗原存在,则在适当位置形成抗原抗体复合物并 沉淀下来。电泳凝胶在洗脱液中漂洗,去除未结合蛋白质 仅保留贮存在凝胶内的抗原抗体复合物。经染色后蛋白质 电泳参考道和抗原抗体沉淀区带被 Acide viole色液着色。 根据电泳移动距离分离出单克隆组分。 人卫定曲版法
实验原理 ❖ 将患者血清在琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后，将固定剂 和各型Ig及其轻链抗血清加于凝胶表面的各自泳道上，经孵 育让固定剂和抗血清在各自泳道对应的凝胶内渗透并扩散， 若有对应抗原存在，则在适当位置形成抗原抗体复合物并 沉淀下来。电泳凝胶在洗脱液中漂洗，去除未结合蛋白质， 仅保留贮存在凝胶内的抗原抗体复合物。经染色后蛋白质 电泳参考道和抗原抗体沉淀区带被Acide Violet染色液着色。 根据电泳移动距离分离出单克隆组分
试剂与器材 ◆ AcideⅤ iolet染色液:用110%冰醋酸溶解 Acide Violet。 令脱色液:用I蒸馏水溶解 Citric acid destain。 ◆清洗液:8L蒸馏水溶解Tris- Buffered saline。 ☆电泳仪: spife3000全自动电泳仪。 人卫定曲版法
试剂与器材 ❖ Acide Violet染色液：用1L 10%冰醋酸溶解Acide Violet。 ❖ 脱色液：用1L蒸馏水溶解Citric Acid Destain。 ❖ 清洗液：8L蒸馏水溶解Tris-Buffered Saline。 ❖ 电泳仪：spife 3000全自动电泳仪
Spife30全自动电泳仪 人卫定曲版法
Spife 3000全自动电泳仪
操作步骤 ◆样本处理: 用生理盐水将血清标本适当稀释后备用,其中同一份血清 第一泳道样本稀释3倍,第二至第六泳道样本稀释5倍。 人卫定曲版法
操作步骤 ❖样本处理： 用生理盐水将血清标本适当稀释后备用，其中同一份血清 第一泳道样本稀释3倍，第二至第六泳道样本稀释5倍
令区带电泳 上样 胶片准备 电泳 人卫定曲版法
❖区带电泳 上样 胶片准备 电泳