原材料的挑选 制作培养基的原材料,成分复杂,变异较大 应挑选各成分较稳定的试剂,各种化学试剂 般应选用分析纯。 制作MH培养基的原材料,尚有胸腺嘧啶和 Ca++、Mg+离子浓度的要求。 使用干粉培养基配制时,应对每一批号的干粉 培养基进行登记并进行以下的质控程序
原材料的挑选 • 制作培养基的原材料,成分复杂,变异较大。 应挑选各成分较稳定的试剂,各种化学试剂一 般应选用分析纯。 • 制作MH培养基的原材料,尚有胸腺嘧啶和 Ca++ 、Mg++离子浓度的要求。 • 使用干粉培养基配制时,应对每一批号的干粉 培养基进行登记并进行以下的质控程序
配制过程 按照实验室内操作手册中,培养基的配 制方法、配制步骤和注意事项进行。 作好配制记录及培养基上的标签,注明 培养基的名称,本批配制量、配方、配 制者,配制日期以及有效日期
配制过程 • 按照实验室内操作手册中,培养基的配 制方法、配制步骤和注意事项进行。 • 作好配制记录及培养基上的标签,注明 培养基的名称,本批配制量、配方、配 制者,配制日期以及有效日期
培养基的一般质量控制 外观 每种培养基均应标注清楚 培养基应澄清,无混浊,有浓度要求的培养基如 1%马尿酸钠培养基应观察失水情况,使用时需补 充失去的水分,最好使用螺旋盖试管 固体培养基应无菌落生长,不干裂。 一般平板培养基2-8℃可贮存1-2周。用塑料袋密封, 冷藏可使用一月,兔血平板至多用一周。培养基与 容器边缘分离则应弃去不用
培养基的一般质量控制 • 外观 – 每种培养基均应标注清楚。 – 培养基应澄清,无混浊,有浓度要求的培养基如 1%马尿酸钠培养基应观察失水情况,使用时需补 充失去的水分,最好使用螺旋盖试管。 – 固体培养基应无菌落生长,不干裂。 – 一般平板培养基2-8℃可贮存1-2周。用塑料袋密封, 冷藏可使用一月,兔血平板至多用一周。培养基与 容器边缘分离则应弃去不用
无菌试验 培养基制作完成灭菌后,应对每批培养基的灭 菌效果进行检测。 分装后进行灭菌的培养基一般随机抽取5% 10%的量,置35℃孵箱中24小时,证明无菌生 长为合格。 无菌手续分装的培养基则应将全部培养基置 35℃孵箱中24小时,进行无菌试验。 对选择性培养基,应取部分培养基加入10-20 倍无抑制性肉汤培养基如TSB,稀释抑制物质 置35℃孵箱中24小时,证明无菌生长为合格
无菌试验 • 培养基制作完成灭菌后,应对每批培养基的灭 菌效果进行检测。 • 分装后进行灭菌的培养基一般随机抽取5%- 10%的量,置35℃孵箱中24小时,证明无菌生 长为合格。 • 无菌手续分装的培养基则应将全部培养基置 35℃孵箱中24小时,进行无菌试验。 • 对选择性培养基,应取部分培养基加入10-20 倍无抑制性肉汤培养基如TSB,稀释抑制物质, 置35℃孵箱中24小时,证明无菌生长为合格
培养基的量 斜面培养基的长度不超过试管的2/3。双 糖铁培养基,底层至少有1cm的直立段 MH平板的厚度应为4mm,即直径为 90mm的平皿,注入25m的培养基即可。 其他平板厚度一般为3mm,在90mm直 径的平皿中注入15-20m的培养基
培养基的量 • 斜面培养基的长度不超过试管的2/3。双 糖铁培养基,底层至少有1cm的直立段。 • MH平板的厚度应为4mm,即直径为 90mm的平皿,注入25ml的培养基即可。 • 其他平板厚度一般为3mm,在90mm直 径的平皿中注入15-20ml的培养基