HindⅡ Bam HI GTCGAC GGATCC CAGCTG CCTAGG GTC GAC CAGTCTG CCTAG GATCC G G 平端切▣ 站端切▣
>同功异源酶： 来源不同的限制酶，但能识别和切割 同一位点，这些酶称同功异源酶。 BamH目 GGATCC CCTAGG CCTAG +GATCE G G Bst I GGATCC CCTAGG CCTAG+GAT G
> 同尾酶 有些限制性内切酶虽然识别序列不完全 相同，但切割DNA后，产生相同的粘性末端， 称为同尾酶。这两个相同的粘性末端称为配 伍未端(compatible end)。 Bam HI Bg1Π GGATCC AGATCT CCTAGG TCTAGA G CCTAG +GATCC二TCTAG+GATCA TCTAG
限制性内切核酸酶 名称 识别序列及切割位点 名 称 识别序列及切割点 切割后产生5’突出末端： Hae亚 5...PuGCGCVPy...3 BamH I 5'...GVGATCC...3' Kpn I 5'..GGTAC7C..3' BglⅡ 5'...AVGATCT...3 Pst I 5...CTGCAVG...3 EcoR I 5'...GVAATTC...3 Sph I 5..GCATGVC...3 HindⅢ 5'..A VAGCTT...3' 切割后产生平末端： paIⅡ 5.C7CGG.,3 Alu I 5’.AG7CT..3' Mbo I 5..7GATC.,,3 EcoR V 5'..GATVATC...3 Nde I 5’.GA7TATG..3 HaeⅢ 5.GG7CC..3 切割后产生3突出末端： PvuIⅡ 5...CAGVCTG...3 Apa I 5...GGGCCVC...3 Sma I 5...CCCVGGG...3
重组DNA技术中常用的工具酶 工具酶 功 能 限制性核酸内切酶识别特异序列，切割DNA DNA连接酶 催化DNA中相邻的5'磷酸基和3'羟基末端之间形成磷酸二酯 键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接 DNA聚合酶I ①合成双链cDNA分子或片段连接 ②缺口平移制作高比活探针 ③DNA序列分析 ④填补3末端 Klenow片段 又名DNA聚合酶大片段，具有完整DNA聚合酶I的5'3'聚合、 3'→5'外切活性，而无5'→3'外切活性。常用于cDNA第二链合 成，双链DNA3'末端标记等 反转录酶 ①合成cDNA ②替代DNA聚合酶I进行填补，标记或DNA序列分析 多聚核苷酸激酶 催化多聚核苷酸5'羟基末端磷酸化，或标记探针 末端转移酶 在3'羟基末端进行同质多聚物加尾 碱性磷酸酶 切除末端磷酸基