>DNA克隆 应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质 (同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的 DNA)与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA 分子一复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细 胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提 取获得大量同一DNA分子,也称基因克隆或重组DNA recombinant DNA)
> 生物技术工程:基因工程、蛋白质工程、酶 工程、细胞工程等。 > 基因工程(genetic engineering) 实现基因 克隆所用的方法及相关的工作称基因工程, 又称重组DNA工艺学。 >目的: ①分离获得某一感兴趣的基因或DNA ②获得感兴趣基因的表达产物(蛋白质)
重组DNA技术基本原理 >基本原理 目的基因的获取→克隆载体的选择和构建 →外源基因与载体的连接→DNA导入受体细胞 一重组体的筛选一→克隆基因的表达
第一节 基因克隆是利用工具酶 进行操作
关健步骤一的工其:基因的剪刀 限制酶 关键步骤二的工具:基因的针线 DNA连接酶 关键步骤三的工具:基因的运载工具一运载体