特点： ➢灵敏度高、特异性强、 准确性好 ➢酶标记试剂能够较长时 间保持稳定 ➢操作简便、对环境没有 污染。 ➢易与其它技术偶联 衍生出适用范围更广的 新方法。 原理： ➢酶标抗体（抗原）与抗原 （抗体）的特异性反应 ➢酶对底物的显色反应 ➢对抗原或抗体进行定位、 定性或定量的测定分析 原理及特点
特点： ➢灵敏度高、特异性强、 准确性好 ➢酶标记试剂能够较长时 间保持稳定 ➢操作简便、对环境没有 污染。 ➢易与其它技术偶联 衍生出适用范围更广的 新方法。 原理： ➢酶标抗体（抗原）与抗原 （抗体）的特异性反应 ➢酶对底物的显色反应 ➢对抗原或抗体进行定位、 定性或定量的测定分析 原理及特点
标记酶的要求： 活性高 性质稳定 专一性强 酶催化底物的显色信号易于判断和测量 方法敏感，重复性好，简单易行 酶的底物易于配制保存，酶及底物价廉 一、酶和酶作用底物
标记酶的要求： 活性高 性质稳定 专一性强 酶催化底物的显色信号易于判断和测量 方法敏感，重复性好，简单易行 酶的底物易于配制保存，酶及底物价廉 一、酶和酶作用底物
辣根过氧化物酶（HRP） 糖蛋白（主酶） 亚铁血红素（辅基） 主酶与酶活性无关 辅基是酶的活性中心 RZ值：403nm （辅基） 与275nm（主酶） OD值之比 RZ值与酶活性无关， 酶活性单位比RZ值 更为重要 ELISA中应用最为广 泛的标记用酶 常用酶 酶和酶作用底物
辣根过氧化物酶（HRP） 糖蛋白（主酶） 亚铁血红素（辅基） 主酶与酶活性无关 辅基是酶的活性中心 RZ值：403nm （辅基） 与275nm（主酶） OD值之比 RZ值与酶活性无关， 酶活性单位比RZ值 更为重要 ELISA中应用最为广 泛的标记用酶 常用酶 酶和酶作用底物
碱性磷酸酶（AP） 菌源性AP 肠粘膜AP β–半乳糖苷酶（β-Gal） 用于均相酶 免疫测定 常用酶 酶和酶作用底物
碱性磷酸酶（AP） 菌源性AP 肠粘膜AP β–半乳糖苷酶（β-Gal） 用于均相酶 免疫测定 常用酶 酶和酶作用底物
HRP的底物 DH2+H2O2→ → → D+2H2O HR P 供氢体DH2习惯上被称为底物，底物有多种 H2O2为受氢体，HRP对受氢体的专一性很 高 常用底物 酶和酶作用底物
HRP的底物 DH2+H2O2→ → → D+2H2O HR P 供氢体DH2习惯上被称为底物，底物有多种 H2O2为受氢体，HRP对受氢体的专一性很 高 常用底物 酶和酶作用底物